[发明专利]用于受控DNA片段化的方法在审
| 申请号： | 201680066568.0 | 申请日： | 2016-11-16 |
| 公开（公告）号： | CN108368503A | 公开（公告）日： | 2018-08-03 |
| 发明（设计）人： | M·尤卡尼斯;A·鲁比斯;R·塔莫塞维希尔斯;E·盖达马尤斯卡斯 | 申请（专利权）人： | 赛默飞世尔科技波罗的海封闭股份公司 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10;C12Q1/6806 |
| 代理公司： | 中国国际贸易促进委员会专利商标事务所 11038 | 代理人： | 刘晓东 |
| 地址： | 立陶宛*** | 国省代码： | 立陶宛;LT |
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| 摘要： | 用于核酸受控活体外片段化的组合物和方法。转座酶与经修饰转座子末端形成催化活性复合物，所述经修饰转座子末端在其末端中包含序列简并、脱嘌呤/脱嘧啶位点、切口或核苷酸间隙，以在受控过程中片段化或剪切靶核酸样品。该方法可产生所需的平均核酸片段尺寸。本发明的组合物和方法可以用于产生包含缩短的转座子末端序列的DNA片段以促进随后的反应，用于产生不对称带尾DNA片段等。 | ||
| 搜索关键词： | 转座子末端 受控 片段化 修饰 催化活性 核酸片段 剪切 靶核酸 不对称 复合物 核苷酸 转座酶 核酸 带尾 活体 简并 位点 嘌呤 嘧啶 | ||
【主权项】：
1.用于在活体外反应中从初始核酸样品中分离核酸的方法，包括：a)提供多种转座体复合物，其包括(i)多种转座酶，(ii)第一转座子末端序列，其中所述第一转座子末端序列能够结合来自所述多种转座酶的转座酶，并且其中所述第一转座子末端序列包含至少一个切口、间隙、脱嘌呤位点或脱嘧啶位点，(iii)第二转座子末端序列，其中所述第二转座子末端序列能够结合来自多种转座酶的转座酶，并且其中所述第二转座子末端序列包含至少一个切口、间隙、脱嘌呤位点或脱嘧啶位点；b)在适宜将所述第一转座子末端序列和所述第二转座子末端序列转座到所述核酸中并使所述核酸片段化的条件下，使所述多种转座体复合物与所述核酸在单一反应混合物中进行接触，其中所述核酸包括第一核酸分子；以及c)通过将所述第一转座子末端序列转座到所述第一核酸分子的第一位置并且片段化并标记所述第一核酸分子，并且通过将所述第二转座子末端序列转座到所述第一核酸分子的第二位置并且片段化并标记所述第一核酸分子，产生具有连接到所述第一转座子末端序列的第一末端和连接到所述第二转座子末端序列的第二末端的至少一个片段化且标记的DNA分子，其中所述至少一个片段化且标记的DNA分子包含具有至少一个切口、间隙、脱嘌呤位点或脱嘧啶位点的第一转座子末端序列，和具有至少一个切口、间隙、脱嘌呤位点或脱嘧啶位点的第二末端。
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