[发明专利]一种重组蝎神经毒素LqhIT2蛋白的制备方法有效
| 申请号： | 201611238087.1 | 申请日： | 2016-12-28 |
| 公开（公告）号： | CN106701774B | 公开（公告）日： | 2021-03-30 |
| 发明（设计）人： | 李洪波;夏玉先 | 申请（专利权）人： | 怀化学院 |
| 主分类号： | C12N15/12 | 分类号： | C12N15/12;C07K14/435;C12N15/81;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/22;C12R1/84 |
| 代理公司： | 北京中政联科专利代理事务所(普通合伙) 11489 | 代理人： | 秦佩 |
| 地址： | 418000 湖*** | 国省代码： | 湖南;43 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种高效制备重组活性蝎昆虫神毒素LqhIT2的方法，主要包括以下步骤：（1）根据LqhIT2成熟毒素的氨基酸序列和毕赤酵母表达系统的特点优化并合成C‑端带有6×His标签的LqhIT2的基因并构建毕赤酵母分泌表达载体；（2）转化重组载体到毕赤酵母宿主中，通过筛选，得到了高水平分泌表达的酵母转化子；（3）酵母宿主中表达重组蝎昆虫神毒素LqhIT2蛋白，经镍亲合层析法，快速得到了纯度达98%以上的重组蝎昆虫神毒素LqhIT2蛋白，纯化的重组蛋白对昆虫细胞具有很强的毒杀活性。本发明改变了传统的用原核宿主大肠杆菌表达昆虫神毒素LqhIT2，探索出用真核宿主毕赤酵母来表达昆虫神毒素LqhIT2的方法，并筛选到了高水平分泌表达的酵母转化子。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 重组 神经 毒素 lqhit2 蛋白 制备 方法 | ||
【主权项】：
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