[发明专利]一种高效丙酸产甲烷菌系的驯化方法

摘要

本发明公开了一种丙酸产甲烷菌系的驯化方法，所述丙酸产甲烷菌系包括丙酸氧化细菌群、互营丙酸氧化菌群、乙酸裂解产甲烷菌群、氢营养型产甲烷菌群，该方法以沼气发酵液为接种物，以丙酸钠为碳源，以生物质材料为附着载体，通过阶梯性提高培养基中丙酸钠的浓度的方法来驯化沼气发酵液来获得高效丙酸产甲烷菌系，得到的丙酸产甲烷菌系具有耐冲击性强，生物强化作用稳定性高等优点，用于提高沼气发酵性能，长期稳定地在丙酸浓度在3.0g/L以上条件下高效利用，产气率为理论产量的75％，丙酸及乙酸的利用率大于90％。

主权项

一种丙酸产甲烷菌系的驯化方法，其特征在于，所述丙酸产甲烷菌系包括丙酸氧化细菌群、互营丙酸氧化菌群、乙酸裂解产甲烷菌群、氢营养型产甲烷菌群，该方法以沼气发酵液为接种物，以丙酸为碳源，以生物质材料为附着载体，通过阶梯性提高培养基中丙酸钠的浓度的方法来驯化沼气发酵液来获得高效丙酸产甲烷菌系，该方法包括以下步骤：在氮气和二氧化碳体积比为4:1的混合气氛中，按体积比为19:1将接种物接种到丙酸钠浓度为0.5g/L的新鲜培养基中进行培养，培养温度为37℃，每24h置换新鲜的培养基，7‑14天为一个培养周期，每培养10‑15天后加入1‑2cm长的能源草，所述能源草与新鲜的培养基的体积比为20％，此后阶梯性提高新鲜培养基中丙酸钠的浓度，直至新鲜培养基中丙酸钠浓度大于3.0g/L，经过10个周期的驯化，获得了目标产物；所述新鲜培养基配制如下：在1L水中加入400mg NH4Cl、250mg MgSO4·6H2O、400mg KCl、120mgCaCl2·2H2O、80mg(NH4)2HPO4、55mg FeCl3·6H2O、5000mg NaHCO3、丙酸钠，还加入CoCl2·6H2O、NiCl2·6H2O、MnCl2·4H2O、CuCl2·2H2O、AlCl3·6H2O、ZnCl2、Na2WO4·2H2O、H3BO3、Na2SeO3、Ma2MoO4·2H2O各0.0005mg，所述丙酸钠的加入量跟相应的培养基所需的丙酸钠浓度一致，所述丙酸的浓度通过在培养基中加入相应量丙酸钠实现，pH调节至7.0。