[发明专利]一种间接阻抗法快速检测酸性罐头食品商业无菌的方法

摘要

本发明公开一种间接阻抗法快速检测酸性罐头食品商业无菌的方法，包括步骤：1、制备实验菌液；2、开启酸性罐头食品并制备样品液；3、间接阻抗法的临界值的确定；4、取被测酸性罐头食品，按步骤2的方法制备成被测样品液；在聚苯乙烯测量瓶中加入1mL新鲜制备的0.2%KOH溶液，取被测样品液接种至装有酸性肉汤培养基的内瓶中，另取等量被测样品液接种至装有麦芽浸膏汤培养基的内瓶中进行检测；5、留样；6、按GB 4789.26‑2013对被测酸性罐头食品内容物进行感官检查和pH测定，对留样内容物和内瓶的培养液进行涂片染色镜检；7、结果的判定。本方法对酸性罐头食品商业无菌的检测快速、灵敏、可靠，准确度高且操作简单方便。

主权项

1.一种间接阻抗法快速检测酸性罐头食品商业无菌的方法，其特征在于，包括以下步骤：/n步骤1：制备实验菌液；/n步骤2：开启酸性罐头食品并制备样品液；/n步骤3：间接阻抗法的临界值的确定；/n步骤4：取被测酸性罐头食品，按步骤2的方法制备成被测样品液；在聚苯乙烯测量瓶中加入1mL新鲜制备的0.2%KOH溶液，取被测样品液接种至装有酸性肉汤培养基的内瓶中，另取等量被测样品液接种至装有麦芽浸膏汤培养基的内瓶中，内瓶完全开放，立即旋紧测量瓶，于15min内将其放入BacTrac4300培养箱中；输入培养温度、测量间隔时间、测量持续时间、预热时间、临界值的测量参数后进行检测；/n步骤5：在开启的被测酸性罐头食品中，以无菌操作取出纯液体不少于30mL，含有固体不少于30g的被测酸性罐头食品内容物放至灭菌容器内留样，保存在2～5℃冰箱中，待该被测酸性罐头食品得出检验结论后可弃去；/n步骤6：按国家标准GB 4789.26-2013对开启的被测酸性罐头食品内容物进行感官检查，pH测定，再对留样内容物和内瓶的培养液进行涂片染色镜检；/n步骤7：当BacTrac4300检测结束后，仪器测量结果为无IDT值时，表明被测酸性罐头食品中无微生物增殖，经感官检查、pH测定、涂片染色镜检确证无微生物增殖现象时，可报告该被测酸性罐头食品为商业无菌；当BacTrac4300检测结束后，仪器测量结果IDT＞0时，表明被测酸性罐头食品中有微生物增殖，经感官检查、pH测定、涂片染色镜检确证有微生物增殖现象时，可报告该被测酸性罐头食品为非商业无菌；/n步骤1所述制备实验菌液的方法为：取实验菌株多粘芽孢杆菌、肠膜明串珠菌和异常汉逊酵母，将多粘芽孢杆菌和肠膜明串珠菌分别接种至酸性肉汤培养基，异常汉逊酵母接种至麦芽浸膏汤培养基，36℃培养72h，然后将各培养物用无菌生理盐水进行10倍稀释即得实验菌液；/n步骤2所述制备样品液的方法为：液体酸性罐头食品摇匀后可直接作为样品液使用，固体酸性罐头食品则称取25g加至225mL灭菌林格氏溶液或蛋白胨缓冲液中进行均质，两者皆有时则各取12.5g加至225mL灭菌林格氏溶液或蛋白胨缓冲液中进行均质混匀得到样品液；/n步骤3所述间接阻抗法的临界值的确定方法为：在聚苯乙烯测量瓶中加入1mL新鲜制备的0.2%KOH溶液，各取1mL实验菌液分别接种至装有5mL相应培养基的内瓶中，内瓶完全开放，立即旋紧测量瓶，于15min内将其放入BacTrac4300培养箱中进行检测；各测量参数预设置为：培养温度：36℃，测量间隔时间：10min，测量持续时间：72h，预热时间：1h，临界值：-25%M；得到实验菌液检测曲线；另选取市场常见的黄桃罐头、桔子罐头、梨罐头、山楂罐头、什锦水果罐头、水黄桃罐头、草莓罐头、菠萝罐头、芒果汁、葡萄罐头、黑莓罐头、杏罐头、杨梅罐头、柑橘罐头、蜜桔罐头的同类酸性罐头食品灭菌后，按步骤2的方法制备得到样品液，在聚苯乙烯测量瓶中加入1mL新鲜制备的0.2%KOH溶液，取1mL样品液接种至装有5mL酸性肉汤培养基的内瓶中，另取1mL样品液接种至装有5mL麦芽浸膏汤培养基的内瓶中，在相同条件下同时进行试验，得到阴性样品产生的基线最大漂移值，确定间接阻抗法的临界值；/n步骤4所述各测量参数设置为：培养温度：36℃，测量间隔时间：10min，测量持续时间：72h，预热时间：1h，评价类型：M2；临界值：步骤3得到的临界值；/n步骤4所述被测样品液、酸性肉汤培养基和麦芽浸膏汤培养基的加样量均为3mL。/n