[发明专利]一种热稳定性提高的脂肪氧合酶突变体及其构建方法有效
申请号: | 201611019626.2 | 申请日: | 2016-11-21 |
公开(公告)号: | CN106754768B | 公开(公告)日: | 2020-07-24 |
发明(设计)人: | 吕凤霞;钱辉;陆兆新;张充;别小妹;赵海珍 | 申请(专利权)人: | 南京农业大学 |
主分类号: | C12N9/02 | 分类号: | C12N9/02;C12N15/11;C12N15/10;C12N15/70 |
代理公司: | 南京经纬专利商标代理有限公司 32200 | 代理人: | 孙昱 |
地址: | 21009*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明提供了一种热稳定性提高的脂肪氧合酶突变体及其构建方法,其中脂肪氧合酶突变体具有如SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.4、SEQ ID NO.5或SEQ ID NO.6中任一种所示的氨基酸序列;构建方法为首先确定鱼腥藻脂肪氧合酶突变位点,然后以重组质粒为模板,在突变位点处利用NNK代替原有密码子设计简并引物,进行全质粒PCR反应,构建3个定点饱和突变库,然后通过转化大肠杆菌和抗性筛选得到3个饱和突变库;最后对3个饱和突变库进行抗性筛选和诱导突变,通过进一步纯化得到纯的脂肪氧合酶突变体。本发明的脂肪氧合酶突变体的热稳定性获得了提高,具有较高的实际应用价值和广阔的市场前景。 | ||
搜索关键词: | 一种 热稳定性 提高 脂肪 氧合酶 突变体 及其 构建 方法 | ||
【主权项】:
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