[发明专利]一种中华鲟VTG蛋白抗原及抗体及制备方法和应用有效
申请号: | 201610932965.3 | 申请日: | 2016-10-24 |
公开(公告)号: | CN106632643B | 公开(公告)日: | 2019-09-24 |
发明(设计)人: | 冷小茜;危起伟;李创举;杜浩;叶欢 | 申请(专利权)人: | 中国水产科学研究院长江水产研究所 |
主分类号: | C07K14/46 | 分类号: | C07K14/46;C07K16/18;C07K16/06;C12N15/70;G01N33/68 |
代理公司: | 武汉宇晨专利事务所 42001 | 代理人: | 王敏锋 |
地址: | 430223 湖北省武*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | 本发明公开了一种中华鲟VTG蛋白抗原及抗体及制备方法和应用,步骤是:1.重组中华鲟VTG蛋白抗原制备:1)设计上游引物,下游引物,扩增结构域截短序列;2)将pMD‑18T‑VTG质粒及Pet32a(+)空载体分别采用EcoRI和XhoI进行酶切后纯化目的片段,将二者连接为Pet32a(+)‑VTG转化DH5a,涂于含有氨苄青霉素的LB培养基上培养;3)将Pet32a(+)‑VTG质粒转化BL21(DE3)感受态细胞,涂于含有氨苄青霉素的LB固体培养基上培养;4)将收集的菌体沉淀,用含8M尿素的蛋白缓冲液重悬沉淀,过滤收集上清得到重组蛋白。2.重组中华鲟VTG蛋白抗原免疫日本大耳兔获得中华鲟VTG蛋白抗体。3.中华鲟VTG蛋白抗原及抗体的用途。中华鲟VTG蛋白抗体与VTG蛋白抗原免疫性好,效价能达到1:1000,检测结果阳性率高,具有良好的临床适用性。 | ||
搜索关键词: | 一种 中华鲟 vtg 蛋白 抗原 抗体 制备 方法 应用 | ||
【主权项】:
1.一种中华鲟VTG蛋白抗原,其特征在于:所述抗原为截短后的VTG功能结构域片段,其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。
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