[发明专利]一种检测肺癌血浆游离目标DNA多位点低频突变的方法和试剂盒在审
| 申请号： | 201610876947.8 | 申请日： | 2016-09-30 |
| 公开（公告）号： | CN107881230A | 公开（公告）日： | 2018-04-06 |
| 发明（设计）人： | 刘赟;邱文青 | 申请（专利权）人： | 复旦大学 |
| 主分类号： | C12Q1/6886 | 分类号： | C12Q1/6886;C12Q1/686;C12Q1/6869 |
| 代理公司： | 上海元一成知识产权代理事务所(普通合伙)31268 | 代理人： | 吴桂琴 |
| 地址： | 20043*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明涉及生物技术领域及核酸检测领域，涉及检测肺癌血浆游离目标DNA多位点低频突变的方法及其试剂盒。本发明提供了高灵敏度和高通量的用于一次性检测肺癌血浆游离DNA多位点突变的方法及试剂盒。该检测方法结合ddPCR及二代测序技术对肺癌ctDNA突变进行检测，包括步骤1)数字PCR混合液制备，包括待测样品DNA模板、引物及PCR预混液；2)制作数字PCR微反应液滴，进行PCR扩增反应；3)PCR产物的回收与纯化；4)二轮PCR混合液制备及扩增；5)PCR产物纯化及文库质控，6.上机测序及数据分析；可一次性检测肺癌EGFR/BRAF/KRAS/PIK3A/MET2/ERBB2/AKT1/NRAS/TP53/PTEN共10个基因的热点突变信息，能显著节约样本，实现高灵敏、高通量的检测肺癌ctDNA突变信息。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 检测 肺癌 血浆 游离 目标 dna 多位点 低频 突变 方法 试剂盒 | ||
【主权项】：
一种检测肺癌血浆游离目标DNA多位点低频突变的方法，包括以下步骤：(1)数字PCR混合液制备，包括模板、引物及PCR预混液；(2)制作PCR微反应液滴，进行PCR扩增反应；(3)PCR产物的回收与纯化；(4)二轮PCR混合液制备，包括模板、引物及PCR预混液，PCR扩增；(5)PCR产物纯化及文库质控。(6)上机测序及数据分析。
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