[发明专利]一种白血病驱动基因的高通量检测方法

摘要

本发明公开了一种白血病基因突变和基因融合的高通量检测方法，本方法选取目前白血病最常见的突变基因和融合基因，结合第二代高通量测序技术，更全面的检测白血病的基因突变和融合情况。第二代高通量测序技术比目前多采用经典的Sanger测序方法检通量大、测序时间段、精确度高、费用低和信息量丰富，可以在短时间内对目标基因进行精确定位和分析。本方法在高通量检测技术的帮助下，可以为临床医生提供更为详尽的基因突变和融合谱来综合判断白血病的预后、指导个性化治疗。

主权项

一种用于白血病基因突变和基因融合的高通量测序检测方法，包括白血病高频突变基因和融合基因高通量测序检测方法；白血病高频突变基因和融合基因高通量测序的方法包括如下步骤：(1)根据人类基因组HG19，调取白血病高频突变基因和融合基因的外显子和内含子序列；常见白血病基因列表如下：调取外显子的序列包含列表基因的基因区域，以及己知各个转录本的启动子和内含子区域;(2)对每个区域中非重复区域设计120bp的探针序列，每个序列沿着基因位置挪动设计，探针之间的挪动大小60bp;(3)采用原位合成技术，在芯片上大量合成设计的探针，并利用多聚酶链式反应和转录的方法扩增出大量的带有生物素标记的探针，并制作白血病驱动基因捕获试剂盒;所述试剂盒筛查方法包括如下步骤:从病人血液中提取1‑3ug DNA ，然后利用白血病常见驱动基因探针将目的基因序列捕获出来，再用测序仪(Illumina Nextseq 500)进行高通量测序，进而分析，找出与白血病相关驱动基因的所有突变信息，从而得到患者白血病的变异情况，以达到准确基因诊断的目的。