[发明专利]用于鉴定赫坎按蚊种团蚊种的多重PCR试剂盒及制备方法

摘要

本发明一种用于鉴定赫坎按蚊种团蚊种的多重PCR试剂盒，包括含有染料的2XTaq PCR Master Mix、无菌双蒸水、1条通用前引物、5条特异性后引物和1个DNA marker；前引物为扩增带足按蚊、赫坎按蚊、雷氏按蚊、近黑按蚊和中华按蚊蚊种特异性条带的通用前引物F1；后引物分别为鉴定带足按蚊的特异性后引物R1、鉴定赫坎按蚊的特异性后引物R2、鉴定雷氏按蚊的特异性后引物R3、鉴定近黑按蚊的特异性后引物R4，以及鉴定中华按蚊的特异性后引物R5。本发明可在同一反应体系中同时检测是否含有上述5种赫坎按蚊种团蚊种，具有较高的特异性和敏感性，可在短时间内检测出结果，无需测序，大大节约了成本。

主权项

一种用于鉴定赫坎按蚊种团蚊种的多重PCR试剂盒，其特征在于：包括含有染料的2XTaq PCR Master Mix、无菌双蒸水、1条通用前引物、5条特异性后引物和1个DNA marker；所述前引物为扩增带足按蚊、赫坎按蚊、雷氏按蚊、近黑按蚊和中华按蚊蚊种特异性条带的通用前引物F1，所述的通用前引物F1的序列如SEQ ID NO.1所示；后引物分别为鉴定带足按蚊的特异性后引物R1、鉴定赫坎按蚊的特异性后引物R2、鉴定雷氏按蚊的特异性后引物R3、鉴定近黑按蚊的特异性后引物R4，以及鉴定中华按蚊的特异性后引物R5，所述的特异性后引物R1的序列如SEQ ID NO.2所示；所述的特异性后引物R2的序列如SEQ ID NO.3所示；所述的特异性后引物R3的序列如SEQ ID NO.4所示；所述的特异性后引物R4的序列如SEQ ID NO.5所示；所述的特异性后引物R5的序列如SEQ ID NO.6所示；所述的通用引物F1的序列如SEQ ID NO.1所示；所述的1个DNA marker所含条带大小和序列，分别如SEQ ID NO.7所示、SEQ ID NO.8所示、SEQ ID NO.9所示、SEQ ID NO.10所示、SEQ ID NO.11所示。