[发明专利]一种利用UPLC-TUV快速检测桑椹花青素及黄酮的方法

摘要

本发明公开了一种利用UPLC‑TUV快速检测桑椹花青素及黄酮的方法，本发明公开了超高效液相色谱检测的检测条件，并且公开了样品的处理方法，本方法通过一定流速及比例梯度洗脱的方式，可快速分离并检测桑椹中3种花青素及5种黄酮，并且灵敏，分离度高，重复性好。

主权项

1.一种利用UPLC‑TUV快速检测桑椹中花青素及黄酮的方法，其特征在于：供试标准品和样品溶液采用相同的体积和相同条件进行UPLC‑TUV分析，条件如下：色谱柱：C18 色谱柱，其规格为1~2.1mm×50~100mm，1.7μm~2.7μm；流动相：流动相包括流动相A和流动相B，按质量分数计，所述流动相A为0.1~1%的磷酸溶液，所述流动相B为含0.1~1%磷酸，30‑50%乙腈的溶液；梯度模式： 0‑3min，流动相中含有质量分数为20‑27%的流动相B；3‑6.5min，流动相中含有质量分数为27‑84%B；6.5‑7min，流动相中含有质量分数为84‑20%B；流速：0.15~0.19 mL/min；检测波长：520nm和358nm；柱温：30~40℃；所述样品溶液采用如下方法制备：将桑椹烘干至恒重，粉碎至小于60目，以粉末与乙醇的质量体积比为1:10将粉末与质量分数为38%的乙醇混合，然后在温度为60℃，功率500W条件下将混合物超声萃取两次，15min/次，分别将每次的混合液4000×g常温离心15min，合并上清液，将上清液过0.22μm PVDF膜，备供试样品溶液用，其所述质量体积比的单位为g/mL；所述标准品由以下方法准备：分别取矢车菊素‑3‑O‑葡萄糖苷、矢车菊素‑3‑O‑芸香苷、天竺葵素‑3‑O‑葡萄糖苷、芦丁、异槲皮素、桑色素、槲皮素、山奈酚标准品用母液稀释分别配制成标品溶液，在温度为4℃条件下保存，所述母液为含0.2%磷酸，40%乙腈的溶液。