[发明专利]一种从红茶中提取茶黄素的方法有效
申请号: | 201610574681.1 | 申请日: | 2016-07-19 |
公开(公告)号: | CN106432167B | 公开(公告)日: | 2018-06-01 |
发明(设计)人: | 孙世利;潘顺顺;赖幸菲;向丽敏;黎秋华;孙伶俐 | 申请(专利权)人: | 广东省农业科学院茶叶研究所 |
主分类号: | C07D311/62 | 分类号: | C07D311/62 |
代理公司: | 广州粤高专利商标代理有限公司 44102 | 代理人: | 林瑞云 |
地址: | 510640 *** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明公开了一种从红茶中提取茶黄素的方法,步骤如下:依次进行乙醇提取和乙酸乙酯萃取后,利用MCl反相色谱柱去除叶绿素;再利用硅胶柱,采用乙酸乙酯‑乙酸溶液进行洗脱;继续利用MCl反相色谱柱,采用甲醇‑乙酸溶液进行梯度洗脱,除去杂质并收集茶黄素段的洗脱液;最后利用C18柱,采用甲醇‑乙酸溶液进行梯度洗脱,除去杂质并收集茶黄素段的洗脱液,得到高纯度茶黄素。本发明以红茶为原料,经过醇提、萃取、脱色、除杂、提纯等步骤,提取红茶中的茶黄素,该方法克服了现有天然茶黄素提取方法得率低和纯度低的缺陷和不足,所得红茶总茶黄素的得率和纯度高;且步骤简单,不涉及剧毒试剂,所需试剂为常见化学试剂,且可重复回收利用。 | ||
搜索关键词: | 茶黄素 红茶 乙酸溶液 反相色谱柱 梯度洗脱 洗脱液 得率 甲醇 叶绿素 高纯度茶黄素 乙酸乙酯萃取 化学试剂 回收利用 剧毒试剂 乙醇提取 乙酸乙酯 脱色 硅胶柱 可重复 天然茶 再利用 提纯 除杂 醇提 黄素 洗脱 萃取 去除 | ||
【主权项】:
1.一种从红茶中提取茶黄素的方法,其特征在于,包括如下步骤:S1.醇提:采用乙醇溶液对红茶进行回流提取,所得提取液进行旋转浓缩除去乙醇,得到红茶浓缩提取液;S2.乙酸乙酯萃取:采用乙酸乙酯对红茶浓缩提取液进行萃取,旋转浓缩除去乙酸乙酯,冷冻干燥得到乙酸乙酯层提取物;S3.脱色:取乙酸乙酯层提取物用甲醇溶液溶解,通过MCl反相色谱填料短柱吸附脱除叶绿素,用甲醇溶液洗脱,收集洗脱液并浓缩干燥得到脱色茶黄素粗品;S4.乙酸乙酯洗脱:取S3所得脱色茶黄素粗品用甲醇溶解后,采用干法拌硅胶,装硅胶柱后,采用乙酸乙酯-乙酸溶液进行洗脱,通过液相色谱检测收集茶黄素段的洗脱液,收集合并洗脱液并浓缩干燥,得到茶黄素粗品;S5.除杂:取S4所得的茶黄素粗品用甲醇-乙酸溶液溶解样品后,采用MCl反相色谱柱,通过不同浓度的甲醇-乙酸溶液进行梯度洗脱,通过液相色谱检测除去杂质,再用甲醇-乙酸溶液洗脱收集茶黄素段的洗脱液,合并茶黄素段洗脱液并浓缩干燥,得到纯化茶黄素;S6.提纯:取S5所得的茶黄素粗品用甲醇-乙酸溶液溶解样品后,采用C18反相色谱柱,通过不同浓度的甲醇-乙酸溶液进行梯度洗脱,通过液相色谱检测除去杂质,再用甲醇-乙酸溶液进行洗脱收集茶黄素段的洗脱液,合并茶黄素段洗脱液并浓缩干燥,得到高纯度茶黄素;其中,步骤S4中,乙酸和乙酸乙酯的体积比为1:40~1:60;步骤S5中,用以溶解茶黄素粗品的甲醇-乙酸溶液中,甲醇浓度是35%~45%,乙酸的浓度是0.05%~0.1%;用以洗脱样品杂质的甲醇-乙酸溶液中,甲醇浓度是35%~45%,乙酸的浓度是0.05%~0.1%;用以洗脱茶黄素段样品的甲醇-乙酸溶液中,甲醇浓度是55%~65%,乙酸的浓度是0.05%~0.1%;步骤S6中,用以溶解茶黄素粗品的甲醇-乙酸溶液中,甲醇浓度是30%~35%,乙酸浓度是0.05%~0.1%;用以洗脱样品杂质的甲醇-乙酸溶液中,甲醇浓度是30%~35%,乙酸浓度是0.05%~0.1%;用以洗脱茶黄素段样品的甲醇-乙酸溶液中,甲醇浓度是50%~55%,乙酸浓度是0.05%~0.1%。
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