[发明专利]一种用于野山参基因组DNA的提取方法在审
申请号: | 201610544033.1 | 申请日: | 2016-07-12 |
公开(公告)号: | CN106148325A | 公开(公告)日: | 2016-11-23 |
发明(设计)人: | 王绪敏;殷金龙;郭海燕;刘贵明;王国良 | 申请(专利权)人: | 中国科学院北京基因组研究所 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 100101 北京市朝阳区北辰西*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明提供一种用于野生人参基因组DNA的提取方法,其包括:将人参样品用液氮研磨成粉末,加入2%CTAB提取缓冲液,摇匀后于65℃水浴1‑3h,13000转/分离心10‑15min,取上清液置于新的离心管中;向得到的上清液中加入氯仿与异戊醇混合液颠倒混匀,离心10‑15min;向得到的上清液中加入氯仿混匀,离心10‑15min;向得到的上清液中加入预冷异戊醇,颠倒混匀,‑20℃放置1‑3h,离心15min,去上清液;用75%乙醇清洗DNA沉淀两次,室温下干燥3min,用重蒸水溶解,‑20℃保存备用。本发明能有效除去DNA提取过程中产生的次生产物,得到野生人参的DNA含量达,纯度高。 | ||
搜索关键词: | 一种 用于 野山参 基因组 dna 提取 方法 | ||
【主权项】:
一种野山参基因组DNA的提取方法,其特征是包括以下步骤:(1) 将野山参样品用液氮研磨成粉末,加入2%CTAB提取缓冲液,摇匀后于65℃水浴1‑3h,13000转/分离心10‑15min,取上清液置于新的离心管中;(2) 向步骤(1)中得到的上清液中加入氯仿与异戊醇混合液颠倒混匀,其中氯仿:异丙醇的体积比为24:1,13000转/分离心10‑15min,取上清液置于新的离心管中;(3) 向步骤(2)中得到的上清液中加入氯仿,颠倒混匀,13000转/分离心10‑15min,取上清液置于新的离心管中;(4) 向步骤(3)中得到的上清液中加入预冷异戊醇,颠倒混匀,‑20℃放置1‑3h,4℃ 13000转/分离心15min,去上清液;(5)用75%乙醇清洗步骤(4)得到的DNA沉淀两次,室温下干燥3min,用50‑100μl重蒸水溶解,‑20℃保存备用。
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