[发明专利]包埋型纳米铁/两种微生物菌剂及其制备方法

摘要

本发明公开了包埋型纳米铁/两种微生物菌剂及其制备方法。该制备方法先将恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida.)和施氏假单胞菌(Pseudomonas stutzeri.)2环制备两种微生物菌剂的菌体A；制备纳米铁溶液B，制备包埋剂琼脂、PVA、SiO2溶液C，制备交联剂硫酸铝饱和硼酸溶液D；按体积比分别取15～18％溶液B，6～15％的菌体A加入到57～66％溶液C中，搅拌混合均匀，在氮气保护的环境下滴加至室温的1‐22％溶液D中，在交联处理，清洗，保存，得到纳米铁/两种微生物菌剂。本发明利用纳米铁和微生物间的协同作用，提高三氯生的降解效率，所制得的菌剂强度高、微生物毒性小、原材料来源价格低廉，可广泛的用于受三氯生污染的水体处理。

主权项

包埋型纳米铁/两种微生物菌剂的制备方法，其特征在于包括如下步骤：(1)菌体的制备：挑取恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida.)和施氏假单胞菌(Pseudomonas stutzeri.)2环，分别转移到营养液中，细菌在35‐37℃的条件下培养1‐3天，以5‐18％的体积比例接种至含增殖培养基的容器中，在35‐37℃的条件下培养1‐3天，离心处理，获得上述菌体的对数生长期细胞；用磷酸盐缓冲液洗涤，按体积百分比计，取37‐45％恶臭假单胞菌、55‐63％的施氏假单胞菌混合，获得两种微生物菌剂的菌体A；(2)纳米铁溶液的制备：采用液相还原法，在氮气保护的液相体系中，强还原剂KBH₄还原FeSO₄·7H₂O得到Fe⁰，用Fe⁰制备浓度为0.1～0.6g/L的纳米铁溶液，记为溶液B；(3)包埋剂琼脂、PVA、SiO₂溶液的制备：将琼脂、PVA在90‐100℃左右的温度下加热完全溶解于清水，得到琼脂质量百分含量为5～9％，PVA质量百分数为7.5～15％的溶液，再加入SiO₂，控制SiO₂在混合物中质量浓度为1～3mg/L，待混合交替冷却至50℃，记为溶液C；(4)交联剂硫酸铝饱和硼酸溶液的制备：将硫酸铝粉末溶于饱和硼酸溶液中，得到摩尔浓度为0.1～1mol/L的硫酸铝的饱和硼酸溶液，记为溶液D；(5)纳米铁/两种微生物菌剂制备：在50‐70℃恒温水浴条件下，按体积比分别取15～18％溶液B，6～15％的菌体A加入到57～66％溶液C中，搅拌混合均匀，在氮气保护的环境下滴加至室温的1‐22％溶液D中，在交联处理，清洗，保存，得到纳米铁/两种微生物菌剂。