[发明专利]一种快速富集分离检测细菌的方法

摘要

本发明公开了一种快速富集分离检测细菌的方法，包括以下步骤：(1)将待测样品与磁珠混合，振摇孵育后进行磁分离，将磁分离后的磁珠重悬于PBS溶液中，得到残余磁珠和吸附有细菌的磁珠悬浮液；(2)在分离管中加入配置好的凝胶，再将步骤(1)得到的悬浮液置于凝胶上，然后进行磁分离；(3)磁分离完成后，通过肉眼观察分离管底部的黑色沉淀，对结果进行定性分析，或建立不同浓度的标准样品分离得到的黑色沉淀量与标准样品浓度的对应关系，再将待测样品分离得到的黑色沉淀量与其对照，判断待测样品中含菌量的范围。本发明能实现复杂样品中细菌的快速分离，对细菌含量在10²CFU/mL及以上的样本进行快速识别和半定量判定。

主权项

1.一种快速富集分离检测细菌的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)将待测样品与磁珠混合，振摇孵育后进行磁分离，将磁分离后的磁珠重悬于PBS溶液中，得到残余磁珠和吸附有细菌的磁珠悬浮液；(2)在分离管中加入配置好的凝胶，再将步骤(1)得到的悬浮液置于凝胶上，然后进形磁分离；(3)磁分离完成后，对结果进行定性分析或半定量分析，定性分析采用肉眼观察，分离管底部有黑色沉淀说明待测样品中含有细菌，没有黑色沉淀说明待测样品中没有细菌或细 菌含量低于10²CFU/mL；半定量分析采用对照法，先建立不同浓度的标准样品分离得到的黑色沉淀量与标准样 品浓度的对应关系，再将待测样品分离得到的黑色沉淀量与其对照，判断待测样品中含菌量的范围；其中，所述待测样品为大肠杆菌或金黄色葡萄球菌；所述磁珠为表面羧基或氨基修饰的Fe₃O₄磁珠，粒径为100～200nm；所述凝胶由聚乙二醇、明胶或琼脂与水按质量比0.25～1.5:1配制得到，所述聚乙二醇、明胶和琼脂的分子量为4000‑10000；所述磁分离的时间为5‑15min。