[发明专利]豌豆活性肽在抑制癌细胞生长中的应用及其制备方法

摘要

本发明涉及一种豌豆活性肽在抑制癌细胞生长中的应用及该豌豆活性肽的制备方法，该肽粉由分子量小于1KDa的肽组成，肽粉来自于豌豆蛋白水解产物；制备方法如下：(1)利用碱性蛋白酶对豌豆蛋白进行酶解反应后将所得到的豌豆蛋白水解物进行冷冻干燥；(2)利用超滤膜对豌豆蛋白酶解液进行分级分离，得到活性最强的组分；(3)收集活性最高的组分，冻干成粉末即所得豌豆肽粉。(4)将干燥得到的粉末溶解在细胞培养液DMEM中，制备成含不同浓度豌豆肽的细胞培养液，用于测定豌豆肽对癌细胞生长的抑制作用。该豌豆活性肽在对癌细胞的抑制率能达到61.92％。

主权项

1.一种豌豆活性肽在抑制人肝癌细胞HepG2中的应用，所述的豌豆活性肽的分子量小于1KDa，所述的豌豆活性肽的制备方法步骤如下：⑴用去离子水配制6g/100ml豌豆蛋白溶液，70℃下热处理豌豆蛋白15min，调节pH值为8.5，按照酶与底物比为10000U/g加入碱性蛋白酶，在55℃水浴中反应5h后，90℃沸水浴灭酶10min；⑵将水解后得到的豌豆蛋白水解液冷冻干燥，将干燥粉溶解在细胞培养液DMEM中，制备成含不同浓度豌豆肽的细胞培养液；⑶利用孔径大小不同的滤膜对豌豆蛋白酶解液进行分级分离，得到分子量小于1KDa的超滤组分；⑷将分子量小于1KDa的超滤组分冻干成粉末，得到豌豆活性肽粉。