[发明专利]一种昆明杯冠藤总皂苷含量的检测方法

摘要

本发明公开了一种昆明杯冠藤总皂苷含量的检测方法，包括（1）设定高效液相色谱条件；（2）制备对照品溶液；（3）制备供试品溶液；（4）含量测定：分别取对照品溶液和供试品溶液各5μl，注入液相色谱仪，进行高效液相色谱仪的操作，并记录色谱图，然后，利用色谱图计算昆明杯冠藤总皂苷的含量。本发明所述检测方法以流动相作提取溶剂，较之于稀乙醇、甲醇等其他溶剂，提取效率更高更完全；且本发明所述检测方法以甲醇和水的二元高压梯度为流动相，该方法简便，灵敏度高，重现性好，样品分离度、对称性及峰形均较好，且保留时间适中，更加适合于常规检测。

主权项

1.一种昆明杯冠藤总皂苷含量的检测方法，其特征在于，包括以下步骤:（1）设定高效液相色谱条件：色谱柱为Agilent TC‑C18：4.6 mm×250 mm，5 um，以浓度为0.1%的乙酸水溶液为流动相 A，以甲醇为流动相 B，洗脱方式为等度洗脱，流速为1.0mL·min‑1，柱温为 30℃，检测波长为 265nm，进样量5μl；（2）制备对照品溶液 ：称取昆明杯冠藤皂苷A对照品，置于容量瓶中，加入流动相，稀释至刻度，摇匀，制成浓度为 0.500mg·ml‑1 的溶液，得到对照品溶液；（3）制备供试品溶液 ：称取供试品粉末，置于容量瓶中，加入流动相，超声提取30min，静置，再用流动相稀释至刻度，摇匀，用0.45μm微孔滤膜滤过，即得供试品溶液；（4）含量测定 ：分别取对照品溶液和供试品溶液各5μl，注入液相色谱仪，进行高效液相色谱仪的操作，并记录色谱图，然后，利用色谱图计算昆明杯冠藤总皂苷的含量，所述的昆明杯冠藤皂苷A的制备方法为：取昆明杯冠藤总皂苷，用浓度为20%的甲醇溶解后过微孔滤膜，经过反相硅胶柱层析吸附后，用浓度为30%的甲醇洗脱，收集洗脱液并在65‑70℃的温度条件下浓缩结晶，即得昆明杯冠藤皂苷A。