[发明专利]酸度调控和凝集素识别的大肠杆菌可视化生物传感方法

摘要

本发明公开了一种酸度调控和凝集素识别的大肠杆菌可视化生物传感方法。处理氯金酸水溶液制备获得葡聚糖修饰的纳米金溶液；处理磁珠水溶液制备获得抗体修饰的磁珠分散液，对待测大肠杆菌进行富集分离，将伴刀豆凝集素蛋白A(ConA)与待测大肠杆菌进行结合，用酸调节pH，降解为二聚体并从菌体表面释放，用碱调节pH形成四聚体ConA分散液，然后与葡聚糖修饰的纳米金溶液发生相互作用，用紫外‑可见分光光度计检测光谱，由光谱获得大肠杆菌可视化检测结果。本发明方法提出了刀豆凝集素ConA的新性质，在充分利用磁珠的分离富集功能的基础上引入凝集素使得葡聚糖修饰的纳米金发生团聚，通过吸光度输出信号检测，方法简便、低成本，应用前景好。

主权项

1.一种酸度调控和凝集素识别的大肠杆菌可视化生物传感方法，其特征在于：先制备抗体修饰的磁珠和葡聚糖修饰的纳米金，通过抗体修饰的磁珠和伴刀豆凝集素蛋白A识别大肠杆菌，通过葡聚糖修饰的纳米金捕获大肠杆菌的信号进行提取，主要包括免疫磁分离、凝集素识别、酸度调控释放、可视化检测的四个步骤；所述方法具体包括：1)处理氯金酸水溶液，制备获得葡聚糖修饰的纳米金溶液；2)处理磁珠水溶液，制备获得抗体修饰的磁珠分散液；3)用步骤2)获得的抗体修饰的磁珠分散液对待测大肠杆菌进行富集分离；4)将伴刀豆凝集素蛋白A与待测大肠杆菌进行结合，得到大肠杆菌悬浮液；5)用酸调节步骤4)获得的大肠杆菌悬浮液的pH，将伴刀豆凝集素蛋白A降解为二聚体并从菌体表面释放，获得二聚体ConA溶液；6)用碱调节步骤5)获得的二聚体ConA溶液的pH形成四聚体ConA分散液，然后将四聚体ConA分散液与步骤1)获得的葡聚糖修饰的纳米金溶液发生相互作用，用紫外‑可见分光光度计检测光谱，由光谱获得大肠杆菌可视化检测结果。