[发明专利]鱼肉中全氟化合物及其前体物质的快速筛查方法

摘要

本发明公开了一种鱼肉中全氟化合物及其前体物质的快速筛查方法，属于水产品检测技术领域。方法采用通过式Oasis PRiME HLB固相萃取净化策略，简化样品前处理程序，去除样品基质中脂肪和磷脂等杂质干扰组分，实现了多种全氟化合物及其前体物质的同步提取；同时，利用液相色谱‑四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱的优势，不仅通过获得精确质量数及丰富的碎片离子信息增强了复杂基质的定性能力，还改善了高分辨质谱的定量效果，实现了一次进样同时确证18种PFCs和21种前体物质的高通量定性筛查，并获得了高灵敏的定量结果。

主权项

一种鱼肉中全氟化合物及其前体物质的快速筛查方法，其特征在于它包括以下步骤:(1)样品提取：准确称取匀浆试样于离心管中，加入内标物，静置后加入乙腈水溶液，涡旋混合，超声提取、离心，移取上清液至比色管中，再用乙腈水溶液定容；(2)样品净化：取提取液直接加载到Oasis PRiME HLB固相萃取柱上，保持一秒一滴的流速，收集全部流出液；准确移取定体积的流出液氮气吹至定体积的1/8体积，再用50％(体积比)甲醇水溶液定容后高速离心，吸取上清液过0.2μm滤膜后得样品待测液；(3)液相色谱‑四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱测定：在优化的色谱、质谱条件下，将全氟化合物及其前体物质的混合标准溶液和样品待测液进样依次测定，以标准溶液中一级全扫描精确质量数提取的各组分及其相应内标物的面积比值为纵坐标，各组分的质量浓度为横坐标进行线性回归分析，将样品溶液的峰面积代入线性回归方程，从而获得样品中目标物的含量；(4)定量分析和定性确证：采用四极杆‑静电场轨道阱高分辨质谱的一级母离子全扫描加数据依赖的二级子离子扫描模式，设定涵盖目标化合物的质量数范围150‑1000m/z进行一级全扫描，并以每个化合物的理论质量数建立二级扫描的目标列表；在扫描过程中，当一级全扫描发现目标列表里的母离子时，且信号强度超过预设值后，就会触发数据依赖子离子扫描模式，进而获得对应母离子精确质量数的二级离子全扫描质谱信息；按照欧盟EC/657/2002关于质谱定性需要4个确证点的要求，选择一级全扫描精确质量数作为定量离子，同时选择二级子离子全扫描中1个丰度相对较高的特征离子作为定性离子，即一个母离子，一个子离子的确证点即可达到4.5，其中高分辨质谱的母离子IP为2.0，子离子IP为2.5，从而实现同时定量分析和定性确证；所述步骤(3)中优化的色谱条件为：Waters BEH C18分析色谱柱2.1×100mm，1.7μm；延迟色谱柱：Waters C18色谱柱2.1mm×50mm，5μm；柱温：40℃；流速：0.25mL/min；进样量：10μL；流动相：A为5％的甲醇水溶液且含5mmol/L乙酸铵，B为95％的甲醇水溶液且含5mmol/L乙酸铵；洗脱梯度：0～0.5min，10％B；0.5～3.0min，10％～50％B；3.0～5.0min，50％～80％B；5.0～8.0min，80％～85％B；8.0～12.0min，85％～100％B；12.0～16.0min，100％B；16.1～18.0，10％B；所述步骤(3)中优化的质谱条件为：加热电喷雾离子源，负离子模式；喷雾电压：‑3.0kV；毛细管温度320℃；加热器温度：50℃；鞘气：40arb；辅助气：5arb；扫描模式：Full Scan‑ddMS2；采集范围m/z 150‑1000；一级全扫描分辨率为70000FWHM，C‑trap最大容量：3×106，C‑trap最大注入时间：200ms；数据依赖二级子离子扫描分辨率为17500FWHM，C‑trap最大容量：1×105，C‑trap最大注入时间：50ms，39种目标化合物的质谱定性和定量离子见表1；表1.39种目标化合物与内标物的质谱分析参数