[发明专利]鱼肉中全氟化合物及其前体物质的快速筛查方法

说明书

技术领域

本发明属于水产品检测技术领域，具体涉及一种鱼肉中全氟化合物及其前体物质的快速筛查方法。

背景技术

全氟化合物(Perfluorinated Compounds，PFCs)是一类新型持久性有机污染物，具有多器官毒性和疑似致癌性。其中，全氟辛烷磺酸(盐)及全氟辛基磺酰氟已被列入《斯德哥尔摩公约》优控名单，在全球范围内限制使用。而除PFCs自身外，PFCs前体物质已被证实是生物体内PFCs污染的主要来源。更重要的是，PFCs前体物质不仅产量巨大，应用和分布范围极为广泛，自然条件下可通过不同方式富集于生物体内并转化为毒性更大和半衰期更长的全氟羧酸和全氟磺酸等PFCs，加之前体物质自身或者转化中间体亦具有生物学毒性，这些都构成了前体物质暴露的潜在危害。因此，PFCs前体物质的生态行为、环境归宿、生物蓄积及安全风险已受到越来越多的研究关注，而如何构建PFCs及其前体物质的高灵敏检测技术是实现这些目标的首要基础，也是国际社会极力解决的关键问题之一。

目前，国内外针对生物基质中PFCs和前体物质的检测方法，多采用液相色谱-串联四极杆质谱法进行分析，但常采用不同的前处理方法或不同的仪器条件进行分类检测，最新的研究报道实现了鱼和贻贝中14种PFCs和10种前体物质的同时检测，但采用了两种色谱梯度洗脱条件分别测定PFCs和前体物质，鱼肉中24种目标化合物的检出限为0.2～3.1μg/kg。由此，现有方法仍存在前处理过程复杂、检出限偏高的不足，一方面难以实现多种全氟化合物及其前体物质简单方便的同步提取，另一方面也难以实现通过一次进样即可完成几十种目标化合物的同时检测。

发明内容

本发明解决的技术问题是提供一种鱼肉中全氟化合物及其前体物质的快速筛查方法。本发明采用90％乙腈提取目标物，高速离心沉淀基质蛋白，再用通过式Oasis PRiME HLB固相萃取小柱去除脂肪、磷脂等基质干扰物，实现了多种PFCs及其前体物质的同步提取程序；同时，在优化色谱、质谱条件的基础上，利用QExactive质谱将四极杆与静电场轨道阱高分辨质谱相结合的优势，不仅通过获得精确质量数及丰富的碎片离子信息增强了复杂基质的定性能力，还改善了高分辨质谱的定量效果，实现了一次进样同时确证18种PFCs和21种前体物质的高通量定性筛查，并获得了高灵敏的定量结果。本发明方法提高了PFCs及其前体物质测定方法的准确性和可靠性，为复杂基质中多组分PFCs及其前体物质的快速筛查和定性确证提供了新技术手段。

本发明是通过以下技术方案实现的:

一种鱼肉中全氟化合物及其前体物质的快速筛查方法，其特征在于，包括以下步骤:

(1)样品提取：准确称取匀浆试样于离心管中，加入内标物，静置后加入乙腈水溶液，涡旋混合，超声提取、离心，移取上清液至比色管中，再用乙腈水溶液定容；

(2)样品净化：取提取液直接加载到Oasis PRiME HLB固相萃取柱上，保持一秒一滴的流速，收集全部流出液，准确移取定体积的流出液氮气吹至定体积的1/8体积，再用50％(体积比)甲醇水溶液定容，高速离心，吸取上清液过0.2μm滤膜后得样品待测液；

(3)液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱测定：在优化的色谱、质谱条件下，将全氟化合物及其前体物质的混合标准溶液和样品待测液进样依次测定，以标准溶液中一级全扫描精确质量数提取的各组分及其相应内标物的面积比值为纵坐标，各组分的质量浓度为横坐标进行线性回归分析，将样品溶液的峰面积代入线性回归方程，从而获得样品中目标物的含量；

(4)定量分析和定性确证：采用四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱的一级母离子全扫描加数据依赖的二级子离子扫描模式(Full MS/dd-MS²)，设定涵盖目标化合物的质量数范围150-1000m/z进行一级全扫描，并以每个化合物的理论质量数建立二级扫描的目标列表；