[发明专利]一种具有抗氧化活性与α-葡萄糖苷酶抑制活性的枸杞叶多酚制备方法

摘要

本发明涉及一种利用大孔树脂柱层析法制备具有抗氧化活性与α‑葡萄糖苷酶抑制活性的枸杞叶多酚的方法。该方法包括沸水浸提，过滤，离心取上清液，减压浓缩，AB‑8大孔树脂柱层析纯化；采用体外清除DPPH自由基、ABTS自由基、超氧阴离子自由基的方法分析了枸杞叶多酚粗提物及经AB‑8大孔树脂处理的多酚样品的体外抗氧化活性，以阿卡波糖作为阳性对照测定了二者对α‑葡萄糖苷酶活性的抑制作用。本方法制备的枸杞叶多酚对自由基有良好的清除能力，对α‑葡萄糖苷酶也有显著的抑制作用。本发明的枸杞叶多酚的制备方法具有提取效率高、重复性好、工艺温和、成本低、不污染环境等优点，制备的多酚具有显著的抗氧化活性与α‑葡萄糖苷酶抑制活性，因此在食品工业及医药行业具有广阔的应用前景。

主权项

一种具有抗氧化活性与α‑葡萄糖苷酶抑制活性的枸杞叶多酚制备方法，其特征在于包括以下操作步骤：(1)取适量枸杞叶茶或枸杞叶以预热去离子水按料液比1∶40于96℃水浴中浸提30min，期间每隔数分钟搅拌一次。(2)将步骤(1)得到的枸杞叶茶浸提液经8层纱布过滤去除茶渣得枸杞叶茶茶汤。(3)将步骤(2)得到的枸杞叶茶茶汤离心(4000rpm，10min)得澄清上清液。(4)将步骤(3)得到的上清液旋蒸，旋蒸温度40℃，上清液旋蒸至颜色呈墨绿色为止。(5)将步骤(4)得到的旋蒸液冷冻干燥得枸杞叶多酚粗提物，粗提物保存于‑20℃冰箱中备用。(6)将步骤(5)所得粗提物以料液比1∶15配置成水溶液后过0.22μm滤膜并通过AB‑8大孔树脂层析柱进行纯化，先后分别以去离子水及80％乙醇洗脱，收集80％乙醇洗脱液；(7)将步骤(6)所得带有颜色的80％乙醇洗脱液收集并旋蒸，旋蒸温度为40℃，乙醇洗脱液旋蒸至呈现黄色为止。(8)将步骤(7)所得旋蒸液冷冻干燥即得含量较高的枸杞叶AB‑8多酚纯化样品。(9)将步骤(5)所得的枸杞叶茶粗提物及步骤(8)得到的枸杞叶多酚纯化样品用去离子水配置系列浓度梯度水溶液，测定二者对DPPH自由基、ABTS自由基、超氧阴离子自由基的清除能力及对α‑葡萄糖苷酶活性的抑制作用。