[发明专利]利用双向电泳技术检测产琥珀酸放线杆菌中酶的方法

摘要

本发明公开了一种利用双向电泳技术检测产琥珀酸放线杆菌中酶的方法，所述方法包括菌体蛋白的提取、第一向IPG等点聚焦电泳、SDS‑PAGE凝胶电泳、凝胶扫描和图像分析等步骤。运用本方法能获得蛋白质清晰、背景清楚的双向电泳凝胶图谱，能够明确得鉴定出产琥珀酸放线杆菌中是否存在β‑葡萄糖苷酶，从而解析产琥珀酸放线杆菌在二糖利用过程中的糖转运和降解机制，对于后续利用产琥珀酸放线杆菌工业化生产丁二酸的过程十分有利，尤其对于碳源优化、发酵过程控制、降低成本有重要的意义。

主权项

一种利用双向电泳技术检测产琥珀酸放线杆菌中酶的方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1）培养产琥珀酸放线杆菌，提取菌体蛋白；步骤2）采用IPG固相胶条，水化上样，进行等点聚焦，等电聚焦完成后平衡胶条；步骤3）转移步骤2）平衡后的胶条至SDS‑PAGE凝胶上进行电泳；步骤4）将所得凝胶染色脱色后，扫描并分析图像。