[发明专利]一种自聚肽融合CD151蛋白及其制备方法与应用有效
| 申请号： | 201610301779.X | 申请日： | 2016-05-09 |
| 公开（公告）号： | CN105906719B | 公开（公告）日： | 2019-06-11 |
| 发明（设计）人： | 孙怀昌;宗晓银;李洋洋;张鑫宇;夏晓莉 | 申请（专利权）人： | 扬州大学 |
| 主分类号： | C07K19/00 | 分类号： | C07K19/00;C12N15/62;C12N15/70;C12N7/02 |
| 代理公司： | 南京知识律师事务所 32207 | 代理人： | 卢亚丽 |
| 地址： | 225009 *** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明属于生物技术研究领域，具体涉及一种自聚肽融合CD151蛋白及其制备方法和应用。所述的自聚肽融合CD151蛋白由猪CD151蛋白PRRSV结合片段和ELK16自聚肽组成，其制备方法包括表达载体构建、融合蛋白表达与纯化、PRRSV结合片段确定以及病毒浓缩、纯化和检测。所述自聚肽融合CD151蛋白可用于猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)浓缩、纯化和环境监测中。与其他方法相比，用本发明的自聚肽融合CD151蛋白浓缩、纯化和检测PRRSV具有敏感、简单和经济等优点，不仅可用于组织样品的PRRSV浓缩和纯化，还可用于环境样品的PRRSV检测和分离培养。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 融合 cd151 蛋白 及其 制备 方法 应用 | ||
【主权项】：
1.一种制备自聚肽融合CD151蛋白的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)将序列如SEQ ID No.1的PT连接头和ELK16自聚肽编码序列插入pET‑30a表达载体，获得融合表达载体pET‑PT16；(2)将PCR克隆的猪CD151蛋白第158～220位氨基酸编码序列插入pET‑PT16载体，获得重组载体pC63‑PT16；所述猪CD151蛋白的mRNA序列如GenBank:AK240006；(3)将重组载体pC63‑PT16转化大肠杆菌，在37℃诱导融合蛋白表达；(3)用14000g离心沉淀融合蛋白；(4)用0.2％TritonX‑100离心洗涤融合蛋白。
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