[发明专利]一种北沙参多糖及其制备方法和应用

摘要

本发明公开了一种北沙参多糖及其制备方法和应用，涉及多糖类技术领域。北沙参多糖的分子量为26.3 kDa；北沙参多糖的单糖组成和摩尔比为：鼠李糖：半乳糖：葡萄糖=2.05：1.00：7.06；并提供了北沙参多糖的一级结构重复单元。本发明北沙参多糖具有提取工艺简单、组分纯度高、抗肿瘤和抗氧化活性好、毒副作用小的优点，适用于抗氧化或抗肿瘤新药的开发和应用。

主权项

1.一种北沙参多糖的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：/n(1)提取/n取干燥的河北道地药材北沙参，粉碎，使用北沙参6-10倍质量的体积分数为95％的食用酒精55-65℃条件下提取2-3次，除去含有的脂溶性化合物；药材残渣挥干乙醇，加入药材残渣18-22倍质量的蒸馏水，使用超声功率200-300W的超声波提取仪75-85℃条件下辅助提取15-20min，然后在75-85℃恒温下水浴提取2.5-3.5h，过滤后重复提取2-3次，合并水提液，减压浓缩至水提液体积的八分之一至十分之一；在搅拌条件下加入无水乙醇使最终乙醇体积含量为75-85％，在3-5℃下静置22-26h，离心，收集沉淀，冷冻干燥后得北沙参粗多糖；/n(2)分离和纯化/na、除蛋白；/nb、除色素；/nc、进一步分离和纯化:/n1)、透析：将除色素完毕的北沙参粗多糖装入截留量为3500Da的透析袋，分别用自来水、蒸馏水透析48h和24h，透析后袋内液冷冻干燥后得北沙参二级粗多糖；/n2)、离子交换柱层析：使用DEAE-cellulose 52纤维素柱层析对北沙参二级粗多糖进行分离纯化，称取北沙参二级粗多糖，使用北沙参二级粗多糖95-105倍质量的蒸馏水溶解，过0.45μm的微孔滤膜过滤，滤液上样于DEAE-cellulose 52纤维素层析柱，分别使用蒸馏水和0–0.8M的梯度NaCl溶液进行洗脱，流速设定为0.5mL/min，自动部分收集器收集，每管收集5.0mL；苯酚-硫酸法跟踪检测北沙参多糖的流出；以吸光度值为纵坐标，洗脱液管数为横坐标绘制洗脱曲线，收集第二个洗脱主峰，减压浓缩、分别用自来水、蒸馏水透析48h和冷冻干燥，得到北沙参精多糖；/n3)、凝胶柱层析：使用葡聚糖凝胶Sephadex G-100柱层析对北沙参精多糖进行纯化，称取北沙参精多糖，用95-105倍质量蒸馏水溶解，过0.45μm的微孔滤膜过滤，滤液上样于Sephadex G-100层析柱，以蒸馏水为洗脱液，流速设定为0.5mL/min，自动部分收集器收集洗脱液，每管收集5.0mL，苯酚-硫酸法跟踪检测多糖的流出；以吸光度值为纵坐标，洗脱液管数为横坐标绘制洗脱曲线，收集第一个洗脱峰，得到组分单一的北沙参多糖。/n