[发明专利]一种α-地中海贫血基因检测试剂盒

摘要

本发明提供了一种可同时检测4种缺失型α‑地中海贫血基因(‑α^3_.7、‑α^4_.2、‑‑^SEA和‑‑^THAI)和3种非缺失α‑地中海贫血基因(α^CSα、α^QSα和α^WSα)的试剂盒，包括DNA芯片、PCR反应液I和PCR反应液II，所述DNA芯片包括基底和固定于所述基底上的探针。本发明的有益效果在于：采用PCR‑反向点杂交的检测原理，根据各基因型的突变或缺失位点，设计相应的扩增引物和探针，以生物素标记引物，以氨基标记探针，并以DNA芯片(尼龙膜)为基底，将探针固定在尼龙膜上，通过特异性引物扩增出来的PCR产物，与固定在DNA芯片上的探针进行杂交、信号显色盒判读来进行地贫的诊断。

主权项

1.一种α‑地中海贫血基因检测试剂盒，其特征在于：包括DNA芯片、PCR反应液I和PCR反应液II，所述DNA芯片包括基底和固定于所述基底上的探针，所述探针包括：非缺失型α‑地中海贫血基因所对应的正常对照探针，其碱基序列如SEQ ID NO：1‑3；用于检测非缺失型α‑地中海贫血基因的探针，其碱基序列如SEQ ID NO：5‑7；用于检测缺失型α‑地中海贫血基因的探针，其碱基序列如SEQ ID NO：9‑12；内参探针，其碱基序列如SEQ ID NO：4和SEQ ID NO：8；所述PCR反应液I包括：扩增缺失型α‑地中海贫血基因的引物，其碱基序列如下：引物3.7F，SEQ ID NO：15；引物3.7R，SEQ ID NO：16；引物4.2F，SEQ ID NO：17；引物4.2R，SEQ ID NO：18；引物SEAF，SEQ ID NO：19；引物SEAR，SEQ ID NO：20；引物THAIF，SEQ ID NO：21；引物THAIR，SEQ ID NO：22；内参引物，其碱基序列如下：引物IC1F，SEQ ID NO：23；引物IC1R，SEQ ID NO：24；所述PCR反应液II包括：扩增非缺失型α‑地中海贫血基因的引物，其碱基序列如下：引物ATF，SEQ ID NO：13；引物ATR，SEQ ID NO：14；内参引物，其碱基序列如下：引物IC2F，SEQ ID NO：25；引物IC2R，SEQ ID NO：26。