[发明专利]一种黄金百香果组织培养育苗的方法

摘要

一种黄金百香果组织培养育苗的方法，包括获取外植体、丛生芽诱导培养、继代增殖培养、炼苗、分割试管苗、试管苗消毒、试管苗移植和生根管理等步骤；本发明育苗速度快，生根率高，种苗成活率大于95%，种苗无病虫害，且操作简单，成本低廉，适于大规模推广，经济效益显著。

主权项

1.一种黄金百香果组织培养育苗的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)获取外植体：挑选健壮无病虫害的黄金百香果植株，用消毒后的剪刀剪取2‑4cm的小段外植体，用无菌水冲洗干净，放入0.3‑0.5％的高锰酸钾溶液浸泡消毒2‑5分钟，无菌水冲洗干净，晾干；(2)丛生芽诱导培养：将晾干的外植体放入含吲哚乙酸、L‑亮氨酸和甘油的生长促进剂Ⅰ中浸泡3分钟，然后接种到诱导培养基中，在温度22℃，湿度70％，光照强度4000lux下培养；(3)继代增殖培养：当丛生芽长度大于1cm后，将丛生芽切下接种到继代增殖培养基中，喷施含吲哚乙酸、萘乙酸、L‑亮氨酸和甘油的生长促进剂Ⅱ，在温度25℃，湿度80％，光照强度6000lux下培养；(4)炼苗：当不定芽长度大于1.5cm时，将含继代增殖培养基的无根苗瓶放于阴凉、避风处，打开瓶盖，喷施含吲哚丁酸、萘乙酸、L‑亮氨酸和甘油的生长促进剂Ⅲ，在温度28℃，湿度85％，光照强度8000lux下，炼苗36小时；(5)分割试管苗：取出试管苗，将长度大于2cm的试管苗单株分割，长度小于2cm的试管苗按2‑3株连体分割，用无菌水清洗去除继代增殖培养基；(6)试管苗消毒：将试管苗用0.3‑0.5％高锰酸钾溶液浸泡消毒2‑5分钟，无菌水清洗，晾干；(7)试管苗移植：将消毒后的试管苗移植于填充有机栽培土的种植盆中，压实，浇足定根水；(8)生根管理：将含有试管苗的种植盆移入带遮阳网的温室，控制温度为30℃，按以下条件调节温室育苗环境：1‑3天，湿度85％，光照强度4000lux；4‑6天，湿度80％，光照强度6000lux；7‑9天，湿度70％，光照强度8000lux；10‑12天，湿度60％，光照强度10000lux；13天后，当95％以上的试管苗长出新叶后，将试管苗移栽到果园；所述生长促进剂Ⅰ含吲哚乙酸0.05mg/L、L‑亮氨酸12mg/L和甘油1.5g/L；所述生长促进剂Ⅱ含吲哚乙酸0.55mg/L、萘乙酸0.5mg/L、L‑亮氨酸15mg/L和甘油2.5g/L；所述生长促进剂Ⅲ含吲哚丁酸1.2mg/L、萘乙酸4mg/L、L‑亮氨酸35mg/L和甘油12g/L；所述诱导培养基为MS+2,4‑二氯苯氧乙酸3mg/L+蔗糖10g/L；所述继代增殖培养基为MS+细胞分裂素0.5mg/L+赤霉素1.5mg/L+蔗糖15g/L；所述有机栽培土为废弃蘑菇菌包、有机肥和风干塘泥的混合物；所述废弃蘑菇菌包、有机肥和风干塘泥的重量比为2:1.5:3；所述有机肥由动物粪便、餐厨垃圾和豆粕粉按重量比3:1:1.5发酵而成。