[发明专利]手足口病病原体检测引物组及试剂盒

摘要

本发明公开了手足口病病原体检测引物组及试剂盒，属于病毒检测技术领域。该手足口病病原体检测引物组包括柯萨奇病毒A16型和/或肠道病毒71型的RT‑LAMP引物，由其组成的检测试剂盒包括微流控芯片和检测液。本发明的引物体系，减少了扩增反应背景，灵敏度和特异性都非常好。试剂盒的检测液体系省略了单独的RT‑PCR的二次扩增步骤，缩短了检测时间，且没有核酸的变复性过程，减少了RNA酶和扩增核酸的污染机会，提高了检测的敏感性和安全性。采用微流控芯片检测系统，降低了对实验硬件的要求，减少了反应试剂用量，降低了检测成本，检测结果可直接通过颜色变化判定，它具有安全、特异、灵敏、便捷的优势。

主权项

1.一种手足口病病原体检测试剂盒，其特征在于，包括手足口病病原体检测引物组，所述手足口病病原体检测引物组包括柯萨奇病毒A16型和/或肠道病毒71型的RT‑LAMP引物，具体核苷酸序列如下：柯萨奇病毒A16型RT‑LAMP引物：CoxA16‑F3：SEQ ID NO:1，CoxA16‑B3：SEQ ID NO:2，CoxA16‑FIP：SEQ ID NO:3，CoxA16‑BIP：SEQ ID NO:4，CoxA16‑LF：SEQ ID NO:5，CoxA16‑LB：SEQ ID NO:6；肠道病毒71型RT‑LAMP引物：EV71‑F3：SEQ ID NO:7，EV71‑B3：SEQ ID NO:8，EV71‑FIP：SEQ ID NO:9，EV71‑BIP：SEQ ID NO:10，EV71‑LF：SEQ ID NO:11，EV71‑LB：SEQ ID NO:12；还包括检测液，所述检测液中包括LAMP缓冲液、dNTPs、有链置换特性的DNA聚合酶、反转录酶、Betaine、MgSO₄、HNB和ddH₂O；还包括用于现场检测的微流控芯片，该芯片包括封接在一起的基板和盖片，基板上设有多个检测单元，每个检测单元由依次连通的进样通道、反应池和连接通道组成，盖片上设有进样孔和排气孔，进样孔对应于进样通道的末端，排气孔对应于连接通道的末端，排气孔的内部或表面有疏水透气介质。