[发明专利]狗咬胶中赭曲霉毒素A的液相色谱-串联质谱检测方法

摘要

本发明公开了一种狗咬胶中赭曲霉毒素A的液相色谱‑串联质谱检测方法，本发明能够准确测定狗咬胶中赭曲霉毒素A的含量。在狗咬胶样品中加入乙腈水溶液超声萃取得到待检液，待检液经HLB固相萃取柱净化，使用C18反相柱分离；目标分析物在多反应监测(MRM)模式下以保留时间和离子对信息比较进行定性分析，外标法定量，本方法分析速度快、灵敏度高、重现性和准确度好，为检测狗咬胶中赭曲霉毒素A提供了检测方法。

主权项

1.一种狗咬胶中赭曲霉毒素A的检测方法，其特征在于包括以下步骤：（一）待测样品的制备：称取4.9‑5.1 g混合均匀的狗咬胶，加入体积比为1比1的乙腈水溶液提取，经超声萃取后，离心过滤后加纯水定容得到待检液；（二）待检液的净化：将固定相萃取柱进行预处理，将步骤（一）制备的待检液上固定相萃取柱，固定相萃取柱为Waters Oasis HLB SPE柱，并通过甲醇、水对SPE柱进行活化处理，经水和体积比为1比2的甲醇/水溶液淋洗除去杂质，再用甲醇作为洗脱溶剂洗脱固定相萃取柱上的赭曲霉毒素A得到洗脱液，将洗脱液浓缩富集后，用甲醇溶剂稀释并经0.22μm微孔滤膜过滤后得到待测样品溶液；（三）待测样品溶液的检测：配制赭曲霉毒素A溶液阶梯浓度的基质校准工作溶液，该基质标准工作溶液的浓度为0.1 ng/mL, 0.5 ng/mL, 1.0 ng/mL, 2.0 ng/mL, 5.0 ng/mL，将步骤（二）中的待测样品溶液和基质校准工作溶液在液相色谱‑串联质谱仪上分别进样，获得以基质校准工作溶液中赭曲霉毒素A的浓度为横坐标，再以基质校准工作溶液中赭曲霉毒素A的峰面积为纵坐标的工作曲线，还有获得可以确定母离子的赭曲霉毒素A的一级质谱图，确定母离子后，采用子离子扫描获得二级质谱图，然后从二级质谱图中选取定量离子和定性离子，然后用基质校准工作溶液曲线对定量离子进行定量计算获得待测样品溶液中赭曲霉毒素A的浓度，所述液相色谱‑串联质谱仪的检测参数为：色谱柱：Agilent ZORAAX Eclipse Plus C18反相柱；流速：0.25 mL/min；流动相：A为0.1%甲酸的水溶液；A为乙腈；进样量：10 μL；色谱柱温度：30 ºC；电喷雾离子源：正离子扫描，电压为4500V；离子源温度：450 ºC；雾化气压力：50 psi；辅助气流速：40 psi；气帘气压力：20 psi；碰撞气压力：20 psi。