[发明专利]一种氨酸酶抑制剂的制备方法

摘要

本发明公开了一种氨酸酶抑制剂的制备方法，属于氨酸酶抑制剂制备技术领域。本发明将茶叶籽粕脱脂后利用乙醇提取，并将提取物与餐后废气食用油混合，每天淋洗风干后的茶果皮，使得茶果皮长菌，之后再用双氧水对长菌的茶果皮进行灭菌，最后将灭菌后出现黑色霉菌的茶果皮再次利用乙醇水溶液进行提取，提取液浓缩后，即可得到氨酸酶抑制剂的制备方法。实例证明，本发明操作简单易行，原料天然易得，不仅制得的氨酸酶抑制剂活性强，IC₅₀值为42.5μg/mL，而且大大提高了氨酸酶抑制剂的提取效率，增强了氨酸酶抑制剂的溶解性和有效性，用于美白化妆品、预防和治疗人体黑色素过多导致的沉着性疾病，具有极好的商业前景。

主权项

一种氨酸酶抑制剂的制备方法，其特征在于具体操作步骤为：（1）称取500～1000g茶果皮，放入清水中反复冲洗，去除表面残留污物后，倒入钢筛中，在阳光下暴晒，直至完全晒干为止，备用；（2）称取100～150g茶叶籽粕，放入粉碎机中，粉碎后过100～105目筛，得茶叶籽粕粉末，置于2L的烧杯中，并向烧杯中以20～30mL/min的速率滴加正乙烷，22～25min后停止滴加，在30～45℃下浸提1～1.5h，待浸提结束，将浸提物取出移入高速离心机中，在1200～1500r/min的转速下离心处理15～20min，去液留渣，置于烘箱中，在105～110℃下烘干至恒重；（3）将上述烘干至恒重后的茶叶籽粕渣放入1L的烧杯中，并向其中加入500～600mL质量浓度为85％的乙醇溶液，混合均匀后，放置在超声振荡仪中，在超声频率为25～28KHz，超声功率为100～120W下振荡反应1～2h，待反应结束，过滤去渣，得到滤液，之后将得到的滤液放入索式抽提器中，抽提40～50min，收集滤液抽提液，随后将得到的滤液抽提液移入蒸馏装置，在65～75℃下加热30～35min，蒸馏去除乙醇，得到茶叶籽粕提取液；（4）在上述得到的茶叶籽粕提取液中加入茶叶籽粕提取物质量1～2倍的餐厅废弃食用油，充分搅拌均匀，调节pH值为5.5～6.2后，每隔一天对上述步骤（1）晒干的茶果皮进行淋洗，淋洗3～5天，使得茶果皮变质长出霉菌，随后再次调节淋洗液pH值为5.7～6.3，每隔3h对已变质长出霉菌的茶果皮进行淋洗，直至茶果皮表面生长出3～5cm的白色菌丝时，停止淋洗，选取质量浓度为30％的双氧水对长出的白色菌丝进行均匀喷洒，每天喷洒3～5次，直至白色菌丝完全消失，出现黑色霉菌；（5）将上述长出黑色霉菌的茶果皮放入搅拌器中，并向其中加入质量浓度为80％的乙醇溶液，直至完全浸没茶果皮为止，之后启动搅拌器，以200～250r/min的转速对混合物进行搅拌，搅拌10～15min，使其完全混合，待搅拌结束，静置10～12h，过滤，去渣，得滤液；（6）将上述得到的滤液放入浓缩罐中，降低罐内压力为1000～1100Pa，减压浓缩至浓缩罐内滤液体积为原有体积的1/3～1/2时，停止浓缩，即可得到一种氨酸酶抑制剂。