[发明专利]一种剖腹产防宫腔粘连专用透明质酸钠凝胶的制备方法

摘要

本发明公开了一种剖腹产防宫腔粘连专用透明质酸钠凝胶的制备方法，属于酸钠凝胶制备技术领域。本发明以眼球玻璃体为原料，除蛋白纯化后透析浓缩干燥制得透明质酸钠粉，再从茶叶中提取茶多酚作为自由基清除剂，肝素钠作抗酶解添加剂，三者复配，从而得到剖腹产防宫腔粘连专用透明质酸钠凝胶的制备方法。本发明操作简便，方法独特，利用提取透明质酸制得透明质酸钠凝胶，并加入抗酶解剂以及自由基清除剂，使得制得的透明质酸钠凝胶生物稳定性良好，不易被透明质酸酶和自由基降解，具有显著的预防宫腔粘连的作用。

主权项

 一种剖腹产防宫腔粘连专用透明质酸钠凝胶的制备方法，其特征在于具体制备步骤为：（1）称取1～2kg牛眼球玻璃体放入10L搪瓷罐中，按固液比为1:2再向罐中加入浓度为0.5mol/L烧碱溶液，于60～70℃水浴条件下搅拌浸提20～30min后，再加入1～2L质量浓度为10%三氯乙酸，用浓度为30%氢氧化钾溶液调节pH至7.0～7.5，保温反应1～2h去除杂蛋白，得混合液；（2）将上述混合液装入透析袋，放置在流动去离子水中透析过夜，打开透析袋取出袋内透析物过滤，去除滤渣得滤液，再将得到滤液加热至80～90℃灭菌处理10～15min，以10mL/min速率向滤液中滴加无水乙醇，直至再无沉淀产生，离心分离得到沉淀物后，经喷雾干燥，研磨后得透明质酸钠粉末，备用；（3）称取300～400g新鲜茶叶，先放入刚玉研钵中研磨成糊状物，之后将糊状物移入陶瓷酶解罐中，按料液比为1:30向罐内加入质量浓度为80%乙醇，再加入酶解底物总质量2.0～3.0%复合植物水解酶，用浓度为0.3mol/L磷酸溶液调节pH至4.0～5.0，于35～45℃下保温酶解3～5h；（4）待酶解完成后，过滤去除滤渣得酶解液，将得到的酶解液放入卧式离心机，在4000～5000r/min转速下离心10～15min分离得到上清液，再将上清液放入旋转蒸发器，于80～85℃下旋蒸浓缩去除多余乙醇，得到自制自由基清除剂，备用；（5）称取10～20g肝素钠和5～10g色甘酸钠溶于200～300mL去离子水中，移入超声分散仪，在100～200W功率下超声分散20～30min，直至两者完全溶解，得抗酶解添加剂；（6）按固液比为1:10将上述备用的透明质酸钠粉末和聚乙二醇混合后移入反应釜中，再加入混合液总体积3～5倍磷酸盐缓冲液，于常温下搅拌10～15min后再加入混合液总质量2～3%的抗酶解添加剂和1～2%的自由基清除剂，用磁力搅拌机搅拌均匀后，放入恒温箱中，在40～50℃下充分溶胀反应3～5h形成凝胶状物质，最后于120～125℃下灭菌8～10min后出料，即得剖腹产防宫腔粘连专用透明质酸钠凝胶。