[发明专利]一种剖腹产防宫腔粘连专用透明质酸钠凝胶的制备方法

权利要求书

1.一种剖腹产防宫腔粘连专用透明质酸钠凝胶的制备方法，其特征在于具体制备步骤为：

（1）称取1～2kg牛眼球玻璃体放入10L搪瓷罐中，按固液比为1:2再向罐中加入浓度为0.5mol/L烧碱溶液，于60～70℃水浴条件下搅拌浸提20～30min后，再加入1～2L质量浓度为10%三氯乙酸，用浓度为30%氢氧化钾溶液调节pH至7.0～7.5，保温反应1～2h去除杂蛋白，得混合液；

（2）将上述混合液装入透析袋，放置在流动去离子水中透析过夜，打开透析袋取出袋内透析物过滤，去除滤渣得滤液，再将得到滤液加热至80～90℃灭菌处理10～15min，以10mL/min速率向滤液中滴加无水乙醇，直至再无沉淀产生，离心分离得到沉淀物后，经喷雾干燥，研磨后得透明质酸钠粉末，备用；

（3）称取300～400g新鲜茶叶，先放入刚玉研钵中研磨成糊状物，之后将糊状物移入陶瓷酶解罐中，按料液比为1:30向罐内加入质量浓度为80%乙醇，再加入酶解底物总质量2.0～3.0%复合植物水解酶，用浓度为0.3mol/L磷酸溶液调节pH至4.0～5.0，于35～45℃下保温酶解3～5h；

（4）待酶解完成后，过滤去除滤渣得酶解液，将得到的酶解液放入卧式离心机，在4000～5000r/min转速下离心10～15min分离得到上清液，再将上清液放入旋转蒸发器，于80～85℃下旋蒸浓缩去除多余乙醇，得到自制自由基清除剂，备用；

（5）称取10～20g肝素钠和5～10g色甘酸钠溶于200～300mL去离子水中，移入超声分散仪，在100～200W功率下超声分散20～30min，直至两者完全溶解，得抗酶解添加剂；

（6）按固液比为1:10将上述备用的透明质酸钠粉末和聚乙二醇混合后移入反应釜中，再加入混合液总体积3～5倍磷酸盐缓冲液，于常温下搅拌10～15min后再加入混合液总质量2～3%的抗酶解添加剂和1～2%的自由基清除剂，用磁力搅拌机搅拌均匀后，放入恒温箱中，在40～50℃下充分溶胀反应3～5h形成凝胶状物质，最后于120～125℃下灭菌8～10min后出料，即得剖腹产防宫腔粘连专用透明质酸钠凝胶。

2.根据权利要求1所述的一种剖腹产防宫腔粘连专用透明质酸钠凝胶的制备方法，其特征在于：所述的复合植物水解酶是由纤维素酶和果胶酶按质量比为2:3复配制得。