[发明专利]一种启动子文库的构建方法及其应用在审
申请号: | 201610138940.6 | 申请日: | 2016-03-11 |
公开(公告)号: | CN105603537A | 公开(公告)日: | 2016-05-25 |
发明(设计)人: | 姜岷;朱兴贵;马江锋;吴明科;高有军 | 申请(专利权)人: | 南京工业大学 |
主分类号: | C40B50/06 | 分类号: | C40B50/06;C40B40/06;G01N21/31;G01N21/64 |
代理公司: | 南京经纬专利商标代理有限公司 32200 | 代理人: | 王月霞 |
地址: | 211816 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明公开了一种启动子文库的构建方法及其应用,构建方法包括如下步骤:1)根据原核生物启动子的保守区、半保守区、随机序列和转录起始位点,设计出具有启动子特征的寡核苷酸序列;2)、将步骤1)设计得到的寡核苷酸序列经退火、延伸形成双链,再连接到带有报告基因的载体上,得到启动子的突变库;3)、将步骤2)得到的启动子的突变库转入到宿主细胞中,涂布到相应抗性的平板中,得到启动子文库。本发明采用人工设计的具有启动子特征的寡核苷酸序列,通过分子聚合和延伸等技术,获得启动子强度跨度理想的启动子文库;该方法快速、高效、廉价、筛选工作量小。 | ||
搜索关键词: | 一种 启动子 文库 构建 方法 及其 应用 | ||
【主权项】:
一种启动子文库的构建方法,其特征在于,包括如下步骤:1)、根据原核生物启动子的保守区、半保守区、随机序列和转录起始位点,设计出具有启动子特征的寡核苷酸序列;2)、将步骤1)设计得到的寡核苷酸序列经退火、延伸形成双链,再连接到带有报告基因的载体上,得到启动子的突变库;3)、将步骤2)得到的启动子的突变库转入到宿主细胞中,涂布到相应抗性的平板中,得到启动子文库。
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