[发明专利]一种胃泌素释放肽前体蛋白表达载体的构建、单抗及试剂盒的制备方法在审
| 申请号： | 201610095916.9 | 申请日： | 2016-02-22 |
| 公开（公告）号： | CN105567724A | 公开（公告）日： | 2016-05-11 |
| 发明（设计）人： | 沈鹤霄;华权高;马峰;马婷;徐春雷 | 申请（专利权）人： | 武汉华美生物工程有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/70 | 分类号： | C12N15/70;C12N15/66;C07K16/26;G01N33/74;G01N33/577;G01N33/543;G01N33/532 |
| 代理公司： | 北京华沛德权律师事务所 11302 | 代理人： | 房德权 |
| 地址： | 430206 湖北省武汉市东*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种胃泌素释放肽前体蛋白表达载体的构建、单抗及试剂盒的制备方法，载体构建时在HSPA6和ProGRP之间加上了肠激酶酶切位点，并且采用N端融合的方式来做融合表达；将重组的HSPA6+ProGRP融合蛋白替代半抗原ProGRP做为免疫原制备单抗，利用肠激酶切掉HSPA6+ProGRP融合蛋白的HSPA6标签部分，得到纯的ProGRP来筛选单克隆抗体；本申请分别将两株单克隆抗体偶联上磁粒子和标记上吖啶酯，可以进行双抗体夹心法的磁粒子化学发光检测样本，作为试剂盒用于样本检测。本发明制备抗体的周期短，效价高，适合用于化学发光试剂盒的检测，可用于临床诊断。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 胃泌素 释放 肽前体 蛋白 表达 载体 构建 试剂盒 制备 方法 | ||
【主权项】：
一种胃泌素释放肽前体蛋白表达载体的构建，其特征在于：包括如下步骤：在HSPA6蛋白基因上引入肠激酶酶切位点序列，通过酶切位点将带肠激酶酶切位点的HSPA6克隆到载体上，得到中间表达载体；通过酶切位点将ProGRP目的基因克隆到所述中间表达载体上，构建得到ProGRP‑HSPA6目的表达载体。
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