[发明专利]一种利用免疫荧光测定古代羊毛织品的检测方法

摘要

本发明涉及文物检测技术领域，公开了一种利用免疫荧光测定古代羊毛织品的检测方法，包括：A）将三块文物样放于A、B、C三个打孔皿中；用PBS缓冲液对文物样进行洗涤；向A中加入兔抗羊毛角蛋白抗体稀释液，C中加入PBS溶液；冷藏后向各打孔皿中加入PBS溶液，浸泡、洗涤；B）向A、B中加入绿色荧光素标记山羊抗兔IgG（H+L）抗体稀释液，C中加入PBS溶液；将A、B、C避光孵育；然后向各打孔皿中加入PBS溶液，浸泡，洗涤；C）向A，B，C中加入缓冲甘油进行封片；D）将A，B，C放置于激光共聚焦显微镜下进行观察检测。本发明方法灵敏度高，操作简单，成本低，结果直观，易于分析。

主权项

一种利用免疫荧光测定古代羊毛织品的检测方法，其特征在于采用如下步骤：A）取三块大小一致的文物样并分别放置于三个打孔皿中，并将打孔皿分别标记为A、B、C；用pH 7.4的PBS缓冲液对文物样进行洗涤直至文物样表面无附着物；接着向A中加入10‑50体积份的兔抗羊毛角蛋白抗体稀释液，向C中加入10‑50体积份的pH7.4的PBS溶液，B不作处理；分别将A、B、C冷藏10‑14h；然后分别向各打孔皿中加入1500‑2500体积份的pH7.4的PBS溶液，浸泡4‑6min，洗涤三次，每次2‑4min；B）分别向A、B中加入10‑50体积份的绿色荧光素标记山羊抗兔 IgG（H+L）抗体稀释液，向C中加入10‑50体积份的pH 7.4的PBS溶液；然后分别将A、B、C放置于底层铺有湿毛巾的盒子中，用锡箔纸将盒子密封，36‑38℃避光孵育0.5‑2h；然后分别向各打孔皿中加入1500‑2500体积份的pH 7.4 的PBS溶液，浸泡4‑6min，洗涤三次，每次2‑4min；C）分别向A，B，C中加入8‑12体积份的缓冲甘油进行封片；D）将A，B，C放置于激光共聚焦显微镜下进行观察；若B，C未发出绿色的荧光，而A发出了绿色的荧光，说明文物样与兔抗羊毛角蛋白抗体发生了特异性结合，证明文物样为羊毛织品。