[发明专利]一种中成药“益肾补骨液”HPLC特征图谱的构建方法

摘要

一种中成药“益肾补骨液”HPLC特征图谱的构建方法，包括（1）供试品溶液的制备（2）对照品溶液的制备取柚皮苷照品适量，精密称定，分别加甲醇制成每1ml约含0.1mg的溶液，（3）测定分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5～15μl，注入高效液相色谱仪，记录120分钟内的色谱图，图谱数据导入《中药色谱指纹图谱相似度评价系统.》2004A版分析，即得“益肾补骨液”的特征图谱。本发明的积极效果是建立的特征图谱技术含量高，避免了益肾补骨制剂质量控制的单一性和片面性，避免了近紫外杂质峰较大吸收情况减少了人为处理产品质量达标的可能性。图谱的峰多，峰形好，易于鉴别，相似性高，专属性强，稳定性好，准确可靠。

主权项

一种中成药“益肾补骨液”HPLC特征图谱的构建方法，包括以下步骤：(1)供试品溶液的制备：取本品5～15ml蒸至近干，加水25～35ml使溶解,加乙醚25～35ml振摇提取，弃去乙醚液，水液用乙酸乙酯振摇提取3次，每次25～35ml,合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇溶解定容至5ml量瓶中，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液；(2)对照品溶液的制备：取柚皮苷照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml约含0.1mg的溶液，即得；(3)测定：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5～15μl，注入高效液相色谱仪，记录120分钟内的色谱图，图谱数据导入《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》2004A版分析，即得“益肾补骨液”的特征图谱；步骤(3)中，所述高效液相色谱测定的色谱条件为：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A，以0.02％磷酸溶液为流动相B，梯度洗脱，流动相A、B的比例变化为：0～10min，A相5％‑14％，B相95％‑86％；10～20min，A相14％‑16％，B相86％‑84％；20～30min，A相16％‑17％，B相84％‑83％；30～55min，A相17％‑18％，B相83％‑82％；55～65min，A相18％‑20％，B相82％‑80％；流速0.8～1.2ml·min‑1，柱温30～40℃，检测波长225～235nm；理论塔板数按柚皮苷峰计算应不低于3000。