[发明专利]一种微生物杀虫剂的制备方法

摘要

本发明涉及农用微生物菌剂技术领域，尤其涉及一种微生物杀虫剂的制备方法，具体步骤为,步骤1苏云金芽孢杆菌斜面培养；步骤2苏云金芽孢杆菌摇瓶培养；步骤3苏云金芽孢杆菌种子培养；步骤4苏云金芽孢杆菌发酵培养，本发明的微生物杀虫剂具有芽孢数量高和伴胞晶体含量高的特点，用于植物虫害防控，随着害虫对植物的进食进入虫体肠道，通过营养菌体、菌体芽孢及其分泌的内毒素（伴孢晶体）、营养期杀虫蛋白、肠毒素、几丁质酶等的交互作用，使害虫进食后患败血症死亡，对瓜果、蔬菜、果树、大田类作物的菜青虫、小菜蛾、甜蛾、斜纹夜蛾、甘蓝夜蛾、烟青虫、玉米螟、稻纵卷叶螟、二化螟、小地老虎等都有毒杀作用。

主权项

一种微生物杀虫剂的制备方法，其特征在于,具体步骤为：步骤1：苏云金芽孢杆菌斜面培养，所述苏云金芽孢杆菌斜面培养温度为32℃～39℃，时间为43h～52h，所述苏云金芽孢杆菌斜面培养培养基配方为：氯化钠0.2%～0.8%，葡萄糖0.2%～0.8%，蛋白胨0.3%～0.7%，琼脂粉1%～3%，其余为水，将pH值调整至7.0～8.5，灭菌后倒斜面，接种培养；步骤2：苏云金芽孢杆菌摇瓶培养，所述苏云金芽孢杆菌摇瓶培养温度为32℃～39℃，时间为22h～30h，转速为180rpm～220rpm，所述苏云金芽孢杆菌摇瓶培养培养基配方为：葡萄糖0.5%～2%，玉米蛋白粉0.5%～2%，蛋白胨0.2%～0.8%，淀粉0.2%～0.8%，将pH值调步骤3：苏云金芽孢杆菌种子培养，所述苏云金芽孢杆菌种子培养培养温度为32℃～39℃，时间为24h～26h，起始搅拌转速为400rpm，接种量为2%～3%，通气比V空气/min：V发酵液体积为0.8:1，根据溶氧情况逐步提高搅拌转数和通气比，搅拌转数最高至600rpm，通气比V空气/min：V发酵液体积最高至1.5:1，待pH值开始回升且尾碳升至最高开始下降时移种，所述苏云金芽孢杆菌种子培养培养基配方为：葡萄糖0.5%～1%，玉米蛋白粉1%，棉籽饼粉0.5%～1%，玉米淀粉0.5%～1%，聚醚消泡剂0.01%，其余为水，灭菌前将pH值调整到7.0～7.5，装料系数为0.6，灭菌后通气保压，降温至32℃～39℃时，接种培养；步骤4：苏云金芽孢杆菌发酵培养，所述苏云金芽孢杆菌发酵培养的温度为32℃～39℃，时间为24h～28h，接种量为10%～20%之间，启始搅拌转速为300rpm，当溶解氧低于20%时增加搅拌转数和通气量，维持溶氧在20%以上，当发酵液中菌体数量≥5*109cfu/ml后，降低发酵液溶氧至5%～10%之间，添加灭菌后的氯化钴、氯化锰等微量元素，添加量为氯化锰0.001%～0.002%，氯化钴0.0015%～0.003%，促进芽孢和伴胞晶体的形成，增加发酵液中的有效成分，待发酵结束时将发酵罐液体排出，进行灌装成品，所述苏云金芽孢杆菌发酵培养培养基配方为：葡萄糖0.2%～1.5%，棉籽饼粉0.5%～3%，玉米浆0.2%～2%，玉米淀粉1%～3%，聚醚消泡剂：0.005%～0.02%，其余为水，灭菌前将pH值调整到7.0～7.5，装料系数为0.6，灭菌后通气保压，降温至32℃～39℃时，接种培养。