[发明专利]一种微生物杀菌剂的制备方法

摘要

本发明涉及农用微生物菌剂技术领域，尤其涉及一种微生物杀菌剂的制备方法，具体步骤为，步骤1枯草芽孢杆菌斜面培养，步骤2枯草芽孢杆菌摇瓶培养，步骤3枯草芽孢杆菌种子培养，步骤4枯草芽孢杆菌发酵培养，步骤5枯草芽孢杆菌发酵罐放罐前2h～6h添加灭菌后的硫酸镁，添加量为0.001%～0.002%，本发明的微生物杀菌剂芽孢转化率高，总菌数多，用于植物病害防控，可抑制病原菌着床，产生多种抗生素、蛋白类抗菌物质，诱导植物产生抗性，具有广谱抗菌活性，增强植物抗逆能力，有效防治作物病害，提高作物抗病、抗旱、抗寒能力。

主权项

一种微生物杀菌剂的制备方法，其特征在于，具体步骤为：步骤1：枯草芽孢杆菌斜面培养，所述枯草芽孢杆菌斜面培养的温度为35℃～42℃，时间为42h～52h，所述枯草芽孢杆菌斜面培养培养基配方为：氯化钠0.2%～0.8%，牛肉膏0.5%～2%，蛋白胨0.2%～0.8%，琼脂粉1%～2%，其余为水，将pH值调整至7.0～8.5，灭菌后倒斜面，接种培养；步骤2：枯草芽孢杆菌摇瓶培养，所述枯草芽孢杆菌摇瓶培养的温度为35℃～42℃，时间为30h～36h，搅拌转速为200rpm，所述枯草芽孢杆菌摇瓶培养培养基配方为：玉米蛋白粉0.2%～0.8%，蛋白胨0.5%～2%，淀粉1%～2%，葡萄糖0.5%～2%，磷酸二氢钾0.05%～0.15%，其余为水，将pH值调整至7.0～8.5，灭菌冷却后接种培养；步骤3：枯草芽孢杆菌种子培养，所述枯草芽孢杆菌种子培养的温度为35℃～42℃，时间为24h～32h，接种量为2%～4%，起始搅拌转速为400rpm，6h前通气比为0.6，之后调至1.3，当尾碳的数值达到最高点开始下降时进行移种，所述枯草芽孢杆菌种子培养过程中不进行pH调整，所述枯草芽孢杆菌种子培养培养基配方为：玉米蛋白粉0.2%～1%，蛋白胨0.5%～2%，淀粉1%～3%，葡萄糖0.5%～2%，磷酸二氢钾0.02%～0.35%；聚醚消泡剂0.01%，其余为水，将pH值调整至7.0～8.5，装料系数为0.6，灭菌后通气保压，降温至35℃～42℃时，接种培养；步骤4：枯草芽孢杆菌发酵培养，所述枯草芽孢杆菌发酵培养的温度为35℃～42℃，时间为15h～26h，起始搅拌转速为400rpm，接种量为5%～10%，6h前通气比为0.8，之后根据发酵液溶氧逐步提升至1.5，当发酵过程中pH低于6.0时，向发酵液中加入氨水进行pH值调整，控制pH在6.0以上，所述枯草芽孢杆菌发酵培养的培养基配方为：玉米蛋白粉0.5%～2%，棉籽饼粉0.2%～1%，淀粉1%～2%，葡萄糖0.5%～2%，磷酸二氢钾0.05%，聚醚消泡剂0.01%，其余为水，灭菌前将pH值调整到7.0～8.5，装料系数为0.6，灭菌后通气保压，降温至35℃～42℃时，接种培养；步骤5：枯草芽孢杆菌发酵罐放罐前2h～6h添加灭菌后的硫酸镁，添加量为0.001%～0.002%，促进芽孢的形成，增加发酵液中的有效成分，待发酵液中菌含量≥5*109cfu/ml，且芽孢比例超过90%时，将发酵罐液体排出，进行成品灌装。