[发明专利]一种糖原合成酶活性测定试剂盒及其方法

摘要

本发明公开了一种糖原合成酶活性测定试剂盒及其方法，该试剂盒包含的试剂有：由Tris-HCl缓冲溶液组成提取液，由Tris、氯化镁、氯化钾、氢氧化钾、盐酸溶于蒸馏水后配制而成的试剂一，由Tris、氯化镁、EDTA、巯基乙醇、盐酸溶于蒸馏水后配制而成的试剂二，由乳酸脱氢酶组成的试剂三，由磷酸烯醇式丙酮酸、NADH和丙酮酸激酶组成的试剂四，由糖原、UDPG、6-磷酸葡萄糖组成的试剂五。本发明的方法通过丙酮酸脱氢酶和乳酸脱氢酶的联合作用，利用分光光度计在340nm处测定NADH的氧化速率反映了糖原合成酶的反应产物UTP的生成速率，从而进一步反映了糖原合成酶的活性，该方法灵敏度高。目前市面上还没有一种有效的基于分光光度法的通过酶联合作用测定糖原合成酶活性的试剂盒。

主权项

一种糖原合成酶活性测定试剂盒，其特征在于，包括以下试剂：提取液，1瓶，4℃保存，由Tris‑HCl缓冲溶液组成，置于60mL试剂瓶中；试剂一，液体×1瓶，4℃保存，由Tris、氯化镁、氯化钾、氢氧化钾、盐酸溶于蒸馏水后配制而成，置于50mL试剂瓶中；试剂二，液体×1瓶，4℃保存，由Tris、氯化镁、EDTA、巯基乙醇、盐酸溶于蒸馏水后配制而成，置于5mL试剂瓶中；试剂三：液体×1支，4℃保存，由乳酸脱氢酶组成，置于1.5mL离心管中；试剂四：粉剂×1支，‑20℃保存；由磷酸烯醇式丙酮酸、NADH和丙酮酸激酶组成，置于1.5mL离心管中；试剂五：粉剂×1瓶，‑20℃保存；由糖原、UDPG、6‑磷酸葡萄糖组成，置于5mL试剂瓶中。