[发明专利]一种无损伤提取中华鲟DNA的方法在审
| 申请号： | 201511013326.9 | 申请日： | 2015-12-31 |
| 公开（公告）号： | CN105400775A | 公开（公告）日： | 2016-03-16 |
| 发明（设计）人： | 胡亚成;杜合军;刘雪清;肖衎;刘娟娟;陈冬娟;王彬忠;赵珣 | 申请（专利权）人： | 中国长江三峡集团公司中华鲟研究所 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 宜昌市三峡专利事务所 42103 | 代理人： | 成钢 |
| 地址： | 443100 *** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | 本发明涉及生物工程领域，特别涉及一种无损伤提取中华鲟DNA的方法。所述方法包括获取样本、样本的处理、裂解细胞、沉淀蛋白质、沉淀DNA、洗涤DNA、获取DNA。本发明建立了一套完整的提取中华鲟粘液的方法，本发明可以快速有效的提取中华鲟DNA，提取的DNA条带清晰，无拖尾现象，说明提取的DNA质量高，不收蛋白质的污染，结果稳定可靠。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 损伤 提取 中华鲟 dna 方法 | ||
【主权项】：
一种无损伤提取中华鲟DNA 的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：1）获取样本：从中华鲟身上刮取粘液，置0‑4℃中保存；2）样本的处理：把所述步骤1）的粘液离心，除去上清液，得到离心后的粘液；3）裂解细胞：把裂解液和蛋白酶K加入所述步骤2）离心后的粘液，50‑60℃下水浴0.5‑1.5 h，得到裂解细胞后的粘液；4）沉淀蛋白质：把饱和酚放入所述步骤2）裂解细胞后的粘液中，震荡20分钟，离心得到上清液，然后在上清液中加入氯仿，震荡18‑25分钟，离心得到除去蛋白质的上清液；5）沉淀DNA：将‑28℃至‑20℃的异丙醇加入所述步骤3）除去蛋白质的上清液，剧烈震荡，离心除去上清液，得到沉淀为DNA；6）洗涤DNA：将70%的乙醇加入所述步骤5）沉淀中，离心除去上清液，洗涤沉淀物2‑4次，得到洗涤后的DNA；7）获取DNA：加入超纯水至所述步骤6）洗涤后的DNA中，置于0‑4℃下保存；完成中华鲟DNA的提取。
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