[发明专利]一种新生儿血型鉴定卡

摘要

本发明涉及一种新生儿血型鉴定卡，包括含有六个微柱的检测卡，所述六个微柱中分别装有等量的抗A凝胶、抗B凝胶、抗AB凝胶、抗D凝胶、抗人球凝胶和空白凝胶，其通过葡聚糖凝胶的溶胀；制备各抗体稀释液；制备各抗体工作液；制备凝胶；分装形成新生儿血型鉴定卡。本发明采用不同大小、不同筛分范围的交联葡聚糖凝胶进行混合，并用纯化水进行溶胀，有效地保证特异性的同时还拥有很高的灵敏度，并有效保证了体系的离子强度。从而实现对于新生儿溶血病进行诊断、预防和治疗具有重要的临床意义。

主权项

一种新生儿血型鉴定卡，包括含有六个微柱的检测卡，所述六个微柱中分别装有等量的抗A凝胶、抗B凝胶、抗AB凝胶、抗D凝胶、抗人球凝胶和空白凝胶，其特征在于：其通过以下方法制备而成：（1）葡聚糖凝胶的溶胀：选用至少两种交联葡聚糖凝胶进行混合，然后加入纯化水中进行充分悬浮溶胀，再用纯化水洗涤去除破碎颗粒，得到大小均匀、呈完整球形的葡聚糖凝胶颗粒；（2）制备各抗体稀释液：抗A稀释液：以生理盐水为基液，其中含有乙二胺四乙酸二钾盐（EDTA二钾盐）10‑15g/L、牛血清白蛋白20‑25g/L、蔗糖15‑20g/L；抗A稀释液的pH值为6.6‑6.8；抗B稀释液：以生理盐水为基液，其中含有乙二胺四乙酸二钾盐15‑20g/L、牛血清白蛋白15‑20g/L、蔗糖25‑30g/L，抗B稀释液的pH值为6.6‑6.8；抗AB稀释液：以生理盐水为基液，其中含有乙二胺四乙酸二钾盐15‑20g/L、牛血清白蛋白10‑15g/L、蔗糖18‑26g/L，稀释液的pH值为6.6‑6.8；抗D稀释液：以磷酸盐缓冲液（PBS）为基液，其中含有乙二胺四乙酸二钾盐10‑15g/L、牛血清白蛋白35‑40g/L，稀释液的pH值为6.6‑6.8；空白凝胶洗涤缓冲液：以纯化水为溶剂，缓冲液中含有氯化钠1.75g‑2.07g/L、磷酸氢二钠0.185‑0.219g/L、磷酸二氢钠0.203‑0.24g/L、甘氨酸18‑21g/L；并调节 pH值为6.6‑6.8；（3）制备各抗体工作液：取抗A单克隆抗体浓缩液与抗A稀释液进行混合，使得到的抗A单克隆抗体工作液的效价≥128；取抗B单克隆抗体浓缩液与抗B稀释液进行混合，使得到的抗B单克隆抗体工作液的效价≥128；取抗AB单克隆抗体浓缩液与抗AB稀释液进行混合，使得到的抗AB单克隆抗体工作液的效价≥128；取抗D单克隆抗体浓缩液与抗D稀释液进行混合，使得到的抗D单克隆抗体工作液的效价≥64；选取对抗D免疫球蛋白（IgG）致敏的红细胞效价≥32的广谱抗人球蛋白试剂；（4）制备凝胶：取六份等量的葡聚糖凝胶颗粒分别用等量的抗A稀释液、抗B稀释液、抗AB稀释液、抗D稀释液、空白凝胶洗涤缓冲液和空白凝胶洗涤缓冲液进行洗涤至少三次，再加入相对应的抗A单克隆抗体工作液、抗B单克隆抗体工作液、抗AB单克隆抗体工作液、抗D单克隆抗体工作液、广谱抗人球蛋白试剂和空白凝胶洗涤缓冲液进行混合，得到抗A凝胶、抗B凝胶、抗AB凝胶、抗D凝胶、抗人球凝胶和空白凝胶；（5）分装：按照每管24‑32微升的量，将抗A凝胶、抗B凝胶、抗AB凝胶、抗D凝胶、抗人球凝胶和空白凝胶分别灌注到六个微柱中，形成新生儿血型鉴定卡。