[发明专利]一种新生儿血型鉴定卡

说明书

技术领域

本发明涉及输血医学领域，尤其涉及一种新生儿血型鉴定卡。

背景技术

新生儿溶血病（HDN）是指由于母子血型不合，母亲体内产生与胎儿血型抗原不配的血型抗体，这种抗体通过胎盘进入到胎儿体内引起同族免疫性溶血，常见于ABO血型系统和Rh血型系统的血型不合，因此新生儿的血型鉴定对于新生儿溶血病的诊断有着重要意义。

新生儿由于自然发生的抗体量较少，大部分要到出生后几个月才会形成血型抗体，且通常亦会存在来源于母体的抗体，因此新生儿的ABO血型检测以及定型为主，无需进行反定型。

微柱凝胶免疫检测技术是20世纪90年代产生的一种免疫检测技术，其基本原理是利用分子筛技术、离心技术和特异性免疫反应技术原理，把血型血清学技术与凝胶分子筛技术有机结合起来，可灵敏地检测出可能存在的微弱血型抗原抗体反应，被认为是血型血清学检验的里程碑。

目前国内外已有一些厂家生产新生儿血型鉴定卡，但是存在以下一些不足：一是采用单一型号的葡聚糖凝胶或聚丙烯葡聚糖凝胶，使得灵敏度与特异性无法兼顾；二是采用生理盐水或抗体缓冲液溶胀凝胶，使得凝胶无法充分完全溶胀，以及破坏反应体系的离子强度；三是对添加不同抗体的凝胶，凝胶洗涤缓冲液完全一致，无法有效保护抗体稳定性；四是仍需要做反定型试验，增加了操作人员的工作负担。

发明内容

本发明就是要克服以上不足，提供一种灵敏度高、特异型好，稳定性强、保质期长的新生儿血型鉴定卡。

为达到上述目的，本发明通过以下技术方案进行解决：

一种新生儿血型鉴定卡，包括含有六个微柱的检测卡，所述六个微柱中分别装有等量的抗A凝胶、抗B凝胶、抗AB凝胶、抗D凝胶、抗人球凝胶和空白凝胶，其通过以下方法制备而成：

（1）葡聚糖凝胶的溶胀：选用至少两种交联葡聚糖凝胶进行混合，然后加入纯化水中进行充分悬浮溶胀，再用纯化水洗涤去除破碎颗粒，得到大小均匀、呈完整球形的葡聚糖凝胶颗粒；

（2）制备各抗体稀释液：

抗A稀释液：以生理盐水为基液，其中含有乙二胺四乙酸二钾盐（EDTA二钾盐）10-15g/L、牛血清白蛋白20-25g/L、蔗糖15-20g/L；抗A稀释液的pH值为6.6-6.8；

抗B稀释液：以生理盐水为基液，其中含有乙二胺四乙酸二钾盐15-20g/L、牛血清白蛋白15-20g/L、蔗糖25-30g/L，抗B稀释液的pH值为6.6-6.8；

抗AB稀释液：以生理盐水为基液，其中含有乙二胺四乙酸二钾盐15-20g/L、牛血清白蛋白10-15g/L、蔗糖18-26g/L，稀释液的pH值为6.6-6.8；

抗D稀释液：以磷酸盐缓冲液（PBS）为基液，其中含有乙二胺四乙酸二钾盐10-15g/L、牛血清白蛋白35-40g/L，稀释液的pH值为6.6-6.8；

空白凝胶洗涤缓冲液：以纯化水为溶剂，缓冲液中含有氯化钠1.75g-2.07g/L、磷酸氢二钠0.185-0.219g/L、磷酸二氢钠0.203-0.24g/L、甘氨酸18-21g/L；并调节pH值为6.6-6.8；

（3）制备各抗体工作液：

取抗A单克隆抗体浓缩液与抗A稀释液进行混合，使得到的抗A单克隆抗体工作液的效价≥128；

取抗B单克隆抗体浓缩液与抗B稀释液进行混合，使得到的抗B单克隆抗体工作液的效价≥128；

取抗AB单克隆抗体浓缩液与抗AB稀释液进行混合，使得到的抗AB单克隆抗体工作液的效价≥128；

取抗D单克隆抗体浓缩液与抗D稀释液进行混合，使得到的抗D单克隆抗体工作液的效价≥64；

选取对抗D免疫球蛋白（IgG）致敏的红细胞效价≥32的广谱抗人球蛋白试剂；

（4）制备凝胶：

取六份等量的葡聚糖凝胶颗粒分别用等量的抗A稀释液、抗B稀释液、抗AB稀释液、抗D稀释液、空白凝胶洗涤缓冲液和空白凝胶洗涤缓冲液进行洗涤至少三次，再加入相对应的抗A单克隆抗体工作液、抗B单克隆抗体工作液、抗AB单克隆抗体工作液、抗D单克隆抗体工作液、广谱抗人球蛋白试剂和空白凝胶洗涤缓冲液进行混合，得到抗A凝胶、抗B凝胶、抗AB凝胶、抗D凝胶、抗人球凝胶和空白凝胶；

（5）分装：