[发明专利]一种新生儿血型鉴定卡在审
申请号: | 201511010701.4 | 申请日: | 2015-12-30 |
公开(公告)号: | CN105606829A | 公开(公告)日: | 2016-05-25 |
发明(设计)人: | 何流;张艳;徐寅生;路金泉;余涛;李亚;尹培培 | 申请(专利权)人: | 合肥天一生物技术研究所 |
主分类号: | G01N33/80 | 分类号: | G01N33/80 |
代理公司: | 合肥天明专利事务所 34115 | 代理人: | 汪贵艳;李万里 |
地址: | 230032 安徽*** | 国省代码: | 安徽;34 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 新生儿 血型 鉴定 | ||
1.一种新生儿血型鉴定卡,包括含有六个微柱的检测卡,所述六个微柱中分别装有等量的抗A凝胶、抗B凝胶、抗AB凝胶、抗D凝胶、抗人球凝胶和空白凝胶,其特征在于:其通过以下方法制备而成:
(1)葡聚糖凝胶的溶胀:选用至少两种交联葡聚糖凝胶进行混合,然后加入纯化水中进行充分悬浮溶胀,再用纯化水洗涤去除破碎颗粒,得到大小均匀、呈完整球形的葡聚糖凝胶颗粒;
(2)制备各抗体稀释液:
抗A稀释液:以生理盐水为基液,其中含有乙二胺四乙酸二钾盐(EDTA二钾盐)10-15g/L、牛血清白蛋白20-25g/L、蔗糖15-20g/L;抗A稀释液的pH值为6.6-6.8;
抗B稀释液:以生理盐水为基液,其中含有乙二胺四乙酸二钾盐15-20g/L、牛血清白蛋白15-20g/L、蔗糖25-30g/L,抗B稀释液的pH值为6.6-6.8;
抗AB稀释液:以生理盐水为基液,其中含有乙二胺四乙酸二钾盐15-20g/L、牛血清白蛋白10-15g/L、蔗糖18-26g/L,稀释液的pH值为6.6-6.8;
抗D稀释液:以磷酸盐缓冲液(PBS)为基液,其中含有乙二胺四乙酸二钾盐10-15g/L、牛血清白蛋白35-40g/L,稀释液的pH值为6.6-6.8;
空白凝胶洗涤缓冲液:以纯化水为溶剂,缓冲液中含有氯化钠1.75g-2.07g/L、磷酸氢二钠0.185-0.219g/L、磷酸二氢钠0.203-0.24g/L、甘氨酸18-21g/L;并调节pH值为6.6-6.8;
(3)制备各抗体工作液:
取抗A单克隆抗体浓缩液与抗A稀释液进行混合,使得到的抗A单克隆抗体工作液的效价≥128;
取抗B单克隆抗体浓缩液与抗B稀释液进行混合,使得到的抗B单克隆抗体工作液的效价≥128;
取抗AB单克隆抗体浓缩液与抗AB稀释液进行混合,使得到的抗AB单克隆抗体工作液的效价≥128;
取抗D单克隆抗体浓缩液与抗D稀释液进行混合,使得到的抗D单克隆抗体工作液的效价≥64;
选取对抗D免疫球蛋白(IgG)致敏的红细胞效价≥32的广谱抗人球蛋白试剂;
(4)制备凝胶:
取六份等量的葡聚糖凝胶颗粒分别用等量的抗A稀释液、抗B稀释液、抗AB稀释液、抗D稀释液、空白凝胶洗涤缓冲液和空白凝胶洗涤缓冲液进行洗涤至少三次,再加入相对应的抗A单克隆抗体工作液、抗B单克隆抗体工作液、抗AB单克隆抗体工作液、抗D单克隆抗体工作液、广谱抗人球蛋白试剂和空白凝胶洗涤缓冲液进行混合,得到抗A凝胶、抗B凝胶、抗AB凝胶、抗D凝胶、抗人球凝胶和空白凝胶;
(5)分装:
按照每管24-32微升的量,将抗A凝胶、抗B凝胶、抗AB凝胶、抗D凝胶、抗人球凝胶和空白凝胶分别灌注到六个微柱中,形成新生儿血型鉴定卡。
2.根据权利要求1所述的新生儿血型鉴定卡,其特征在于:所述步骤(1)中交联葡聚糖凝胶为交联葡聚糖凝胶G-25、交联葡聚糖凝胶G-50、交联葡聚糖凝胶G-75或交联葡聚糖凝胶G-100。
3.根据权利要求1所述的新生儿血型鉴定卡,其特征在于:所述步骤(1)中在交联葡聚糖凝胶混合物中加入纯化水中进行充分悬浮溶胀,其中交联葡聚糖凝胶混合物和纯化水的质量体积比为1:2-1:3。
4.根据权利要求1所述的新生儿血型鉴定卡,其特征在于:所述步骤(1)中悬浮溶胀的时间为48-72小时。
5.根据权利要求1所述的新生儿血型鉴定卡,其特征在于:所述步骤(4)中抗A单克隆抗体工作液、抗B单克隆抗体工作液、抗AB单克隆抗体工作液、抗D单克隆抗体工作液、广谱抗人球蛋白试剂、空白凝胶洗涤缓冲液分别与洗涤后葡聚糖凝胶颗粒按体积比为1:2-1:3进行混合。
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