[发明专利]烟草ABCF内参基因的克隆方法及其应用有效
申请号: | 201510997440.3 | 申请日: | 2015-12-24 |
公开(公告)号: | CN105400793B | 公开(公告)日: | 2019-01-08 |
发明(设计)人: | 谢小东;杨军;秦广雍;罗朝鹏;武明珠;王中;李泽锋;许亚龙;林福呈 | 申请(专利权)人: | 中国烟草总公司郑州烟草研究院;郑州大学 |
主分类号: | C12N15/29 | 分类号: | C12N15/29;C12N15/10;C12Q1/6895;C12Q1/6851 |
代理公司: | 郑州优盾知识产权代理有限公司 41125 | 代理人: | 郑园;张真真 |
地址: | 450001 河南省*** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | 本发明属于分子生物学技术领域,具体涉及烟草ABCF(ATP‑Binding CassetteF)内参基因的克隆方法及其应用。本发明所获得的ABCF基因的核苷酸序列可作为研究烟草功能基因或不同组织、不同生长发育阶段以及不同激素处理条件下的基因表达分析的内参基因。利用该内参基因设计的实时荧光定量PCR引物扩增特异性强,能够提高烟草基因表达分析研究的稳定性、可靠性和重复性。 | ||
搜索关键词: | 内参基因 烟草 克隆 实时荧光定量PCR 分子生物学技术 基因表达分析 生长发育阶段 核苷酸序列 表达分析 功能基因 激素处理 特异性强 烟草基因 引物扩增 应用 基因 研究 | ||
【主权项】:
1.一种烟草ABCF内参基因的克隆方法,其特征在于:通过对烟草组织样本的芯片表达数据分析,筛选出烟草ABCF基因,以引物对ABCF‑F/ABCF‑R进行PCR扩增、获得阳性克隆,后经质粒测序验证;其中引物序列如SEQ ID NO.1/SEQ ID NO.2所示;所获得的目的片段如SEQ ID NO.3,大小为1811bp;所述ABCF内参基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。
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