[发明专利]循环肿瘤干细胞鉴定试剂盒在审
申请号: | 201510918962.X | 申请日: | 2015-12-10 |
公开(公告)号: | CN106868101A | 公开(公告)日: | 2017-06-20 |
发明(设计)人: | 刘苏燕;吴诗扬;董艳 | 申请(专利权)人: | 益善生物技术股份有限公司 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68 |
代理公司: | 广州华进联合专利商标代理有限公司44224 | 代理人: | 万志香,胡杰 |
地址: | 510663 广东省广州市广州科*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明涉及循环肿瘤干细胞鉴定试剂盒,其包括针对每种标志基因mRNA的捕获探、针、扩增探针和标记探针,所述标志基因mRNA包括有三种类选自CD133、CD34、CD44、Nanog、Oct4、ALDH1A1、CD24、C-MYC、BMI-1、c-Kit中的至少两种的循环肿瘤干细胞标志基因mRNA,选自EPCAM、E-cadherin、KRT7、KRT19、KRT20中的至少一种的上皮细胞标志基因mRNA,选自N-cadherin、vimentin、fibronectin、MMP9、AKT2至少一种的间质细胞标志基因mRNA。本发明避免了假阳性结果,进一步提高了检测结果的准确度和可信度。 | ||
搜索关键词: | 循环 肿瘤 干细胞 鉴定 试剂盒 | ||
【主权项】:
一种循环肿瘤干细胞鉴定试剂盒,其特征在于,包括针对每种标志基因mRNA的捕获探针、扩增探针和标记探针,所述标志基因mRNA包括有以下三类:选自CD133、CD34、CD44、Nanog、Oct4、ALDH1A1、CD24、C‑MYC、BMI‑1、c‑Kit中的至少两种的循环肿瘤干细胞标志基因mRNA,选自EPCAM、E‑cadherin、KRT7、KRT19、KRT20中的至少一种的上皮细胞标志基因mRNA,选自N‑cadherin、vimentin、fibronectin、MMP9、AKT2中的至少一种的间质细胞标志基因mRNA;其中,所述捕获探针连接标志基因mRNA与扩增探针,每条捕获探针从5’端到3’端的碱基组成依次为:与待检测的标志基因mRNA结合的特异性序列P1、间隔臂序列、P2序列,所述P2序列为不存在发夹结构,探针内部和探针间不形成二聚体、不存在错配,与P1、P4和标志基因mRNA之间均不存在特异性结合的序列,针对同一类别的标志基因的捕获探针的P2序列相同;每条扩增探针从5’端到3’端的碱基组成依次为:能与相应捕获探针的P2序列互补配对的P3序列、间隔臂序列、P4序列;所述P4序列为不存在发夹结构,探针内部和探针间不形成二聚体、不存在错配、与P1、P2、P3和总mRNA之间均不存在特异性结合的序列;每条标记探针具有与相应扩增探针P4序列互补配对的P5序列,且末端修饰有荧光基团,不同细胞种类标志基因的荧光基团互不相同。
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