[发明专利]一种用于鉴别四倍体大燕麦、普通小麦或其杂交后代染色体数的制片方法

摘要

本发明公开了一种用于鉴别四倍体大燕麦、普通小麦或其杂交后代染色体数的制片方法，包括预处理、固定、酶解、酸解、后低渗、后固定、制片、染色以及压片等步骤。本发明通过对常规方法进行改进，得到了一种能够有效鉴别四倍体大燕麦、普通小麦或其杂交后代染色体数的制片方法，实验证明采用该方法得到的制片中细胞分裂相多、染色体分散好，而且重复性高，结果可靠。因此，本发明为鉴别四倍体大燕麦、普通小麦或其杂交后代染色体的数目提供了一种新的方法，也为大燕麦与普通小麦的杂交和选育工作提供了技术支持。

主权项

1.一种用于鉴别四倍体大燕麦与普通小麦的杂交后代染色体数的制片方法，其特征在于包括以下步骤：(1)预处理：0.075mol/L KCl溶液、饱和α‑溴代萘溶液和蒸馏水按照体积比2：3：5配制成预处理液，将植物材料浸泡于预处理液中，22‑25℃处理3小时后，水洗15分钟；(2)固定：甲醇与冰醋酸按照体积比3：1配制成固定液，将预处理后的植物材料用固定液固定，22‑25℃固定1小时，水洗15分钟；(3)酶解：2％纤维素酶和2％果胶酶按照体积比1:1配制成酶解液，将固定后的植物材料用酶解液在37℃下酶解2小时，快速水洗，避免剧烈震荡；(4)酸解：浓盐酸和95％乙醇按照体积比1：1配制成酸解液，将酶解后的植物材料用酸解液22‑25℃处理1分钟，水洗15分钟；(5)后低渗：酸解后的植物材料置于0.075mol/L KCl溶液中，22‑25℃处理1小时；(6)后固定：经后低渗处理后的植物材料用步骤(2)中的固定液22‑25℃固定1小时以上；(7)制片：挑取2‑3个经上述步骤处理后的植物材料，用玻棒用力砸碎后轻轻铺散到整个载玻片，而后进行火焰干燥；(8)染色；(9)压片。