[发明专利]一种酶活提高的谷氨酸脱羧酶突变体构建及其应用有效
| 申请号： | 201510815792.2 | 申请日： | 2015-11-23 |
| 公开（公告）号： | CN105255849B | 公开（公告）日： | 2018-12-04 |
| 发明（设计）人： | 饶志明;张显;杨套伟;徐美娟 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12N9/88 | 分类号： | C12N9/88;C12N15/60;C12N15/70;C12N15/77;C12N1/21;C12P13/00 |
| 代理公司： | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人： | 耿晓岳 |
| 地址： | 214122 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种酶活提高的谷氨酸脱羧酶突变体及其构建方法，属于基因工程领域。本发明的突变体是在SEQ ID N0.1所示的氨基酸的基础上，将第172位酪氨酸突变成半胱氨酸。本发明得到的突变体在大肠杆菌中表达，摇瓶发酵24h后酶活为28.6U/mL，突变酶活提高了81％，底物亲和力较原始酶降低53％，同时比酶活提高83％，在35℃下酶的半衰期由16h延长至24h。在大肠杆菌中表达该重组酶，并全细胞转化谷氨酸18h可得到283.8g/L的γ‑氨基丁酸；在谷氨酸棒菌中表达该重组酶，并全细胞转化谷氨酸18h可得到126.7g/L的γ‑氨基丁酸。本发明表明172位氨基酸残基对酶的催化作用和稳定性有较大影响，对该酶的催化机理的研究提供了一定的基础，并提高了该酶的工业应用潜力。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 提高 谷氨酸 脱羧酶 突变体 构建 及其 应用 | ||
【主权项】：
1.一种谷氨酸脱羧酶突变体，其特征在于，所述突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。
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