[发明专利]一种对幽门螺杆菌同时进行分型和定量的方法

摘要

本发明公开了一种制作可用于检测患者胃粘膜上皮中幽门螺杆菌方法，可以同时进行分型和定量，属于生物学检测的领域。涉及到利用MGB探针双重荧光定量PCR技术测定患者胃粘膜上皮中幽门螺杆菌含量的方法。还涉及到利用MGB探针双重荧光定量PCR技术制作幽门螺杆菌特异性毒力基因CagA和VacA双基因的标准曲线。本发明能大幅提高检测患者胃粘膜中幽门螺杆菌的效率，简化检测程序。

主权项

一种对幽门螺杆菌同时进行分型和定量的方法，其特征在于该方法包括如下步骤： A 用试剂盒提取幽门螺杆菌的国际标准株基因组DNA，合成目的基因的特异性引物，制备分别含有CagA和VacA的重组质粒；B 将重组质粒测浓度后梯度稀释，根据CagA和VacA的基因序列各合成一段MGB探针，进行双重荧光定量PCR反应，绘制基因循环数和拷贝数的关系，获得标准曲线；C取患者胃粘膜上皮，经适当处理后提取DNA，按照上述MGB探针双重荧光定量PCR检测方法检测临床样本幽门螺杆菌，根据Ct值可进行细菌分型，拷贝数可反映细菌含量。