[发明专利]利用激光辅助酶解促进蛋白质N末端肽段鉴定的方法在审
| 申请号： | 201510794958.7 | 申请日： | 2015-11-18 |
| 公开（公告）号： | CN105301091A | 公开（公告）日： | 2016-02-03 |
| 发明（设计）人： | 张祥民;李兰婷 | 申请（专利权）人： | 复旦大学 |
| 主分类号： | G01N27/62 | 分类号： | G01N27/62 |
| 代理公司： | 上海正旦专利代理有限公司 31200 | 代理人： | 陆飞;盛志范 |
| 地址： | 200433 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明属于生物技术领域，具体为一种利用激光辅助酶解促进蛋白质N末端鉴定的方法。本发明方法的步骤：首先对蛋白进行氨基封闭，再加入胰蛋白酶（蛋白量的2.5%-5%）；然后用808 nm红外激光垂直照射5-80 s封闭蛋白，对其进行激光辅助酶解；最后，利用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱或者液相色谱质谱联用仪器鉴定蛋白N末端肽段。本发明方法可以大大缩短蛋白质N末端肽段鉴定所需的酶解时间，使得单个蛋白的N末端肽段信号较传统溶液酶解增强，同时，可以使得复杂蛋白质组样本的N末端肽段鉴定数目得到提高。 | ||
| 搜索关键词： | 利用 激光 辅助 促进 蛋白质 端肽 鉴定 方法 | ||
【主权项】：
一种利用激光辅助酶解促进蛋白质N末端鉴定的方法，其特征在于具体步骤为：首先，对蛋白进行氨基封闭，再加入胰蛋白酶，加入量为蛋白重量的2.5%‑5%，得到蛋白和酶的混合物；然后，利用808 nm红外激光对蛋白和酶的混合物垂直照射5 s 以上，对其进行激光辅助酶解；最后，利用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱或者液相色谱质谱联用仪器进行蛋白质N末端的检测。
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