[发明专利]一种转基因植株DNA的提取方法

摘要

一种转基因植株DNA的提取方法，包括以下步骤：(1)先将CTAB提取液预热；(2)取转基因植株叶片置于研钵中，将其研磨成匀浆液；(3)吸取匀浆液加入到离心管中，水浴，轻摇；(4)待水浴结束后取出离心管，向每管匀浆液中加入氯仿，混匀，然后将离心管在常温下离心；(5)吸取离心管中的上清液加入到新的离心管中，再加入异丙醇，混匀，沉淀，离心；(6)去除上清，用酒精洗涤沉淀，移除酒精，然后在常温下离心，再用移液枪吸取离心管中剩余的酒精，在室温下放置；(7)往离心管中加入的TE缓冲液溶解沉淀，摇匀，溶解完全，即得转基因植株DNA提取液。本发明的提取方法得到DNA的质量和得率都大大提高，适合于大规模转基因拟南芥或烟草DNA的提取。

主权项

一种转基因植株DNA的提取方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)先将2％CTAB提取液置于65℃水浴锅中预热，在使用前摇匀；(2)取转基因烟草或拟南芥叶片1‑2g置于研钵中，向研钵中加入预热后的CTAB提取液2.4mL，再加入1‑2g石英砂，将其研磨成匀浆液，得到匀浆液；(3)吸取1.0mL匀浆液加入到2mL离心管中，置于65℃水浴1h，每20min轻摇1次；(4)待水浴结束后取出离心管，向每管匀浆液中加入0.6mL氯仿，混匀，然后将离心管在常温、转速为10000r/min下离心8min；(5)吸取离心管中的上清液0.7mL加入到另一个新的2mL离心管中，再加入0.5mL的异丙醇，混匀，于‑20℃沉淀20min，在常温、转速为10000r/min下离心8min；(6)去除上清，用1mL 70％的酒精洗涤沉淀1次，移除酒精，然后在常温、转速为10000r/min下离心1min，再用移液枪吸取离心管中剩余的酒精，在室温下放置5‑10min；(7)往离心管中加入200μL的TE缓冲液溶解沉淀，摇匀，使之溶解完全，所得溶液即为转基因烟草或拟南芥DNA提取液，将其置于‑20℃下保存，备用。