[发明专利]一种转基因植株DNA的提取方法在审
| 申请号: | 201510785699.1 | 申请日: | 2015-11-16 |
| 公开(公告)号: | CN105368814A | 公开(公告)日: | 2016-03-02 |
| 发明(设计)人: | 罗聪;余海霞;何新华 | 申请(专利权)人: | 广西大学 |
| 主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10 |
| 代理公司: | 北京中誉威圣知识产权代理有限公司 11279 | 代理人: | 王正茂 |
| 地址: | 530004 广西壮族*** | 国省代码: | 广西;45 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 转基因 植株 dna 提取 方法 | ||
1.一种转基因植株DNA的提取方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)先将2%CTAB提取液置于65℃水浴锅中预热,在使用前摇匀;
(2)取转基因烟草或拟南芥叶片1-2g置于研钵中,向研钵中加入预热后 的CTAB提取液2.4mL,再加入1-2g石英砂,将其研磨成匀浆液,得到匀浆 液;
(3)吸取1.0mL匀浆液加入到2mL离心管中,置于65℃水浴1h,每 20min轻摇1次;
(4)待水浴结束后取出离心管,向每管匀浆液中加入0.6mL氯仿,混匀, 然后将离心管在常温、转速为10000r/min下离心8min;
(5)吸取离心管中的上清液0.7mL加入到另一个新的2mL离心管中, 再加入0.5mL的异丙醇,混匀,于-20℃沉淀20min,在常温、转速为10000r/min 下离心8min;
(6)去除上清,用1mL70%的酒精洗涤沉淀1次,移除酒精,然后在常 温、转速为10000r/min下离心1min,再用移液枪吸取离心管中剩余的酒精, 在室温下放置5-10min;
(7)往离心管中加入200μL的TE缓冲液溶解沉淀,摇匀,使之溶解完 全,所得溶液即为转基因烟草或拟南芥DNA提取液,将其置于-20℃下保存, 备用。
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