[发明专利]测定人PON1基因rs662位点多态性的方法及试剂盒在审
申请号: | 201510618596.6 | 申请日: | 2015-09-24 |
公开(公告)号: | CN105274214A | 公开(公告)日: | 2016-01-27 |
发明(设计)人: | 姚武;张光辉;任静朝;邓娜;袁利飞;王团伟;王彭彭;段晓冉;冯晓蕾;刘素娜;李娟;杨永利;施学忠;王威 | 申请(专利权)人: | 郑州大学 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68 |
代理公司: | 北京迎硕知识产权代理事务所(普通合伙) 11512 | 代理人: | 张群峰;吕良 |
地址: | 450001 *** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | 测定人PON1基因rs662位点多态性的方法及试剂盒。该方法包括:提供待测人基因组DNA;提供扩增人PON1基因rs662位点附近序列的上游引物和下游引物,其中下游引物具有错配碱基A;以所述待测人基因组DNA为模板,利用上游引物和下游引物进行PCR扩增反应以获得含RATTC片段或RATT片段的扩增产物,其中R为人PON1基因rs662位点上的待定碱基A或G;提供限制性内切酶;利用限制性内切酶对所得扩增产物进行酶切以获得相应的酶切产物;以及根据所得酶切产物来确定人PON1基因rs662位点上的待定碱基R是A还是G。限制性内切酶为仅能够切开GATTC片段与AATTC片段之一,或者GATT片段与AATT片段之一的限制性内切酶。本发明的测定手段不但快速可靠,而且测定成本大大降低。 | ||
搜索关键词: | 测定 pon1 基因 rs662 多态性 方法 试剂盒 | ||
【主权项】:
一种测定人PON1基因rs662位点多态性的方法,包括:提供待测人基因组DNA;提供扩增人PON1基因rs662位点附近序列的上游引物和下游引物,其中下游引物具有错配碱基A;以所述待测人基因组DNA为模板,利用上游引物和下游引物进行PCR扩增反应以获得含RATTC片段或RATT的扩增产物,其中R为人PON1基因rs662位点上的待定碱基A或G;提供限制性内切酶;利用限制性内切酶对所得扩增产物进行酶切以获得相应的酶切产物;以及根据所得酶切产物来确定人PON1基因rs662位点上的待定碱基R是A还是G,其中,限制性内切酶为仅能够切开GATTC片段与AATTC片段之一,或者GATT片段与AATT片段之一的限制性内切酶。
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